STUDIES OF CONFORMATIONAL CHANGES IN SOLUBLE GUANYLATE CYCLASE

可溶性鸟苷酸环化酶构象变化的研究

基本信息

  • 批准号:
    8170312
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.1万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    美国
  • 项目类别:
  • 财政年份:
    2010
  • 资助国家:
    美国
  • 起止时间:
    2010-05-01 至 2011-02-28
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

This subproject is one of many research subprojects utilizing the resources provided by a Center grant funded by NIH/NCRR. The subproject and investigator (PI) may have received primary funding from another NIH source, and thus could be represented in other CRISP entries. The institution listed is for the Center, which is not necessarily the institution for the investigator. Soluble guanylate cyclase (sGC), a 150 kD heterodimeric protein, is the primary nitric oxide (NO) receptor in the cell. NO binds to heme in the N-terminal domain of the beta subunit, stimulates the production of cGMP and leads to NO-dependent signaling cascades. In vitro studies have shown that a probably allosteric conformational change takes place when ligands bind. In addition to the physiological ligand NO, there are effector ligands, typified by YC-1 that act in concert with carbon monoxide (CO). We request beam time to perform small angle x-ray scattering studies on soluble guanylate cyclase in order to characterize ligand binding associated conformational changes. Several different domains and constructs of both human and Manduca sexta sGC have been expressed by recombinant methods and are available, or will become available in the near future. Preliminary analytical ultracentrifugation studies demonstrate that the conformational change is large enough to be characterized by SAXS and that the protein does not aggregate significantly under the conditions of the centrifugation experiment.
该副本是利用众多研究子项目之一 由NIH/NCRR资助的中心赠款提供的资源。子弹和 调查员(PI)可能已经从其他NIH来源获得了主要资金, 因此可以在其他清晰的条目中代表。列出的机构是 对于中心,这不一定是调查员的机构。 150 kd的异二聚体蛋白可溶性鸟苷酸环化酶(SGC)是细胞中的主要一氧化氮(NO)受体。在β亚基的N末端结构域中,NO与血红素结合,刺激CGMP的产生,并导致无依赖性信号级联反应。 体外研究表明,配体结合时可能发生变构构象变化。 除了生理配体NO之外,还有YC-1的效应配体与一氧化碳(CO)一起起作用。 我们要求对可溶性鸟苷酸环化酶进行小角度X射线散射研究的光束时间,以表征配体结合相关构象变化。 人类和曼达卡·塞克斯塔SGC的几个不同领域和构造已通过重组方法表达,并且可以在不久的将来使用,或者将在不久的将来使用。 初步分析性超速离心研究表明,构象变化足够大,可以以SAX为特征,并且在离心实验的条件下,蛋白质不会显着汇总。

项目成果

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