Spectrin-Actin Junctions of the Erythrocyte Skeleton
红细胞骨架的血影蛋白-肌动蛋白连接
基本信息
- 批准号:7266948
- 负责人:
- 金额:$ 40.06万
- 依托单位:
- 依托单位国家:美国
- 项目类别:
- 财政年份:2005
- 资助国家:美国
- 起止时间:2005-07-01 至 2010-06-30
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:AccountingActinsAffectAffinityAmino AcidsAreaAttentionBindingBinding ProteinsBinding SitesBiological AssayCD47 geneCell membraneCellsCellular biologyComplexCrosslinkerCytoskeletonDefectEF-Hand DomainElectron MicroscopyErythrocyte GhostErythrocytesF-ActinFosteringFreeze DryingFreezingGlutathione S-TransferaseGold ColloidGrantIn SituLipid BindingLocalizedMapsMeasuresMembraneMembrane ProteinsMethodsMicrofilamentsModelingMolecularMorphologic artifactsMusMutationOrganellesPeptide FragmentsPeptidesPhenotypePost-Translational Protein ProcessingProteinsResolutionRoleScientistSedimentation processSeriesSiteSkeletal systemSkeletonSpectrinStructureTailTestingVariantWorkalpha Spectrinbasecofactorcrosslinkinterestmutantphotolysisprotein 4.1research studyshear stressstoichiometry
项目摘要
DESCRIPTION (provided by applicant): The red blood cell (RBC) membrane skeleton is composed principally of short F-actin filaments cross-linked by a2B2 spectrin tetramers with the assistance of protein 4.1 R. Actin and 4.1 R bind to the actin binding domain (BSpABD) at the tail of the spectrin B chain. The adjacent end of a-spectrin, called the EF hand domain (aSpEF), has been considered inert; however, the sph(1J) mouse, which has very unstable RBC membranes, makes a mutant a-spectrin that lacks the last 13 amino acids (aSpEFAC13), showing that the domain has an important function in spectrin-actin binding. 1) We will determine what binds to aSpEF, using pull-down assays or photoactivatable cross-linking, and extracts containing all RBC membrane proteins. Initial studies show that aSpEF but not aSpEFAC13 binds to protein 4.2 in a Ca (2+)-dependent manner. We will characterize this and other aSpEF-protein interactions and investigate whether post-translational modifications or other factors affect the binding. 2) We will ascertain whether binding site fragments that interfere with aSpEF interactions decrease membrane stability measured in the ektacytometer. 3) We will prepare a series of mini-spectrins consisting of the BSpABD domain and variants of the aSpEF domain attached by the last 4 spectrin repeats in each chain. The binding of these mini-spectrins to F actin and the roles of 4.1 R, 4.2 and other aSpEF binding proteins will be assessed. 4) Finally, we will identify proteins adjacent to 4.1 R or 4.2 on the membrane, or adjacent to aSpEF in actin junctional complexes using photoactivatable crosslinkers, and we will visualize the structure of the normal unstretched membrane skeleton and the skeletal defects in 4.2(-) and sph (1J) mice using high resolution EM and immunoEM. These studies will provide new information about the molecular junctions that form the core of the membrane skeleton and will illuminate the functions of the previously little studied EF hand domain. Since plasma membranes of all cells and membranes of many organelles have spectrin skeletons, these studies will be of broad interest in cell biology.
描述(申请人提供):红细胞 (RBC) 膜骨架主要由短 F-肌动蛋白丝组成,在蛋白质 4.1 R 的帮助下通过 a2B2 血影蛋白四聚体交联。肌动蛋白和 4.1 R 与肌动蛋白结合结构域结合(BSpABD) 位于血影蛋白 B 链的尾部。 a-血影蛋白的相邻末端称为 EF 手结构域 (aSpEF),被认为是惰性的;然而,红细胞膜非常不稳定的 sph(1J) 小鼠会产生缺乏最后 13 个氨基酸的突变型 a-血影蛋白 (aSpEFAC13),表明该结构域在血影蛋白-肌动蛋白结合中具有重要功能。 1) 我们将使用下拉分析或光活化交联以及含有所有红细胞膜蛋白的提取物来确定与 aSpEF 结合的物质。初步研究表明 aSpEF 而不是 aSpEFAC13 以 Ca (2+) 依赖性方式与蛋白 4.2 结合。我们将表征这种相互作用以及其他 aSpEF-蛋白质相互作用,并研究翻译后修饰或其他因素是否影响结合。 2) 我们将确定干扰 aSpEF 相互作用的结合位点片段是否会降低 ektacytometer 中测量的膜稳定性。 3) 我们将制备一系列微型血影蛋白,其中包含 BSpABD 结构域和 aSpEF 结构域的变体,每条链中最后 4 个血影蛋白重复连接有 aSpEF 结构域的变体。将评估这些微型血影蛋白与 F 肌动蛋白的结合以及 4.1 R、4.2 和其他 aSpEF 结合蛋白的作用。 4) 最后,我们将使用光活化交联剂识别膜上与 4.1 R 或 4.2 相邻的蛋白质,或肌动蛋白连接复合物中与 aSpEF 相邻的蛋白质,并且我们将可视化正常未拉伸膜骨架的结构和 4.2(- ) 和 sph (1J) 小鼠使用高分辨率 EM 和免疫 EM。这些研究将提供有关形成膜骨架核心的分子连接的新信息,并将阐明以前很少研究的 EF 手结构域的功能。由于所有细胞的质膜和许多细胞器的膜都具有血影蛋白骨架,因此这些研究将在细胞生物学中引起广泛的兴趣。
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ patent.updateTime }}
SAMUEL E LUX其他文献
SAMUEL E LUX的其他文献
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
{{ truncateString('SAMUEL E LUX', 18)}}的其他基金
Spectrin-Actin Junctions of the Erythrocyte Skeleton
红细胞骨架的血影蛋白-肌动蛋白连接
- 批准号:
7442281 - 财政年份:2005
- 资助金额:
$ 40.06万 - 项目类别:
Spectrin-Actin Junctions of the Erythrocyte Skeleton
红细胞骨架的血影蛋白-肌动蛋白连接
- 批准号:
7086317 - 财政年份:2005
- 资助金额:
$ 40.06万 - 项目类别:
Spectrin-Actin Junctions of the Erythrocyte Skeleton
红细胞骨架的血影蛋白-肌动蛋白连接
- 批准号:
7644430 - 财政年份:2005
- 资助金额:
$ 40.06万 - 项目类别:
Spectrin-Actin Junctions of the Erythrocyte Skeleton
红细胞骨架的血影蛋白-肌动蛋白连接
- 批准号:
6962170 - 财政年份:2005
- 资助金额:
$ 40.06万 - 项目类别:
Cellular functions of membrane skeleton proteins, band 3
膜骨架蛋白带 3 的细胞功能
- 批准号:
6647334 - 财政年份:2002
- 资助金额:
$ 40.06万 - 项目类别:
相似国自然基金
生长发育期镧暴露影响钙信号与血脑屏障细胞旁通透性的研究
- 批准号:81502837
- 批准年份:2015
- 资助金额:18.0 万元
- 项目类别:青年科学基金项目
抑制LIMK2从而直接特异性地提高成骨细胞的力学敏感性对加速骨改建进程的影响及其分子机制的研究
- 批准号:81570955
- 批准年份:2015
- 资助金额:57.0 万元
- 项目类别:面上项目
从肌动蛋白骨架重排探讨益气清热解毒法对肾小球足细胞损伤的影响
- 批准号:81473614
- 批准年份:2014
- 资助金额:74.0 万元
- 项目类别:面上项目
组蛋白乙酰化酶抑制物(INHAT)SET对食管癌细胞"间充质式迁移"的影响及机制研究
- 批准号:U1404817
- 批准年份:2014
- 资助金额:30.0 万元
- 项目类别:联合基金项目
ATP水解机理对肌动蛋白组装成纤维过程的影响
- 批准号:21274038
- 批准年份:2012
- 资助金额:82.0 万元
- 项目类别:面上项目
相似海外基金
Emerging role of tumor-derived exosomes in immune modulation and breast cancer health disparity.
肿瘤源性外泌体在免疫调节和乳腺癌健康差异中的新作用。
- 批准号:
10726647 - 财政年份:2023
- 资助金额:
$ 40.06万 - 项目类别:
ROCK, tight junctions and prematurity in the pathogenesis of necrotizing enterocolitis and neonatal sepsis.
坏死性小肠结肠炎和新生儿败血症发病机制中的 ROCK、紧密连接和早产。
- 批准号:
10659615 - 财政年份:2023
- 资助金额:
$ 40.06万 - 项目类别:
Hyaluronan as a mediator of intrauterine growth restriction-induced islet dysfunction in type 2 diabetes
透明质酸作为 2 型糖尿病宫内生长受限诱导的胰岛功能障碍的介质
- 批准号:
10303293 - 财政年份:2021
- 资助金额:
$ 40.06万 - 项目类别:
Hyaluronan as a mediator of intrauterine growth restriction-induced islet dysfunction in type 2 diabetes
透明质酸作为 2 型糖尿病宫内生长受限诱导的胰岛功能障碍的介质
- 批准号:
10436997 - 财政年份:2021
- 资助金额:
$ 40.06万 - 项目类别:
Diversity Supplement to Structural Dynamics of Cardiac Myosin-Binding Protein C Regulation
心肌肌球蛋白结合蛋白 C 调节结构动力学的多样性补充
- 批准号:
10412720 - 财政年份:2021
- 资助金额:
$ 40.06万 - 项目类别: