WATER AND ELECTROLYTES IN HEALTH AND DISEASE

水和电解质与健康和疾病的关系

基本信息

项目摘要

The role of reduced glutathione in preserving renal function and structure will be investigated, using the isolated perfused rat kidney as a model. We have preliminary evidence that glutathione depletion may produce lesions localized to the thick ascending limb associated with disproportionate reduction in concentrating ability. Specific inhibition of GSH synthesis and cellular depletion of GSH in a variety of ways will be employed, and an attempt made to correlate histological evidence of structural damage to cells and functional alterations, with tissue levels of reduced thiols, using both histochemical and enzymatic methods to evaluate this. The way in which Na-K-ATPase is activated when transepithelial transport is increased will be studied in the isolated perfused elasmobranch rectal gland. Intracellular sodium will be monitored non-invasively and sequentially by a new technique using nuclear magnetic resonance (23Na NMR). Steady-state levels of phosphorus intermediates will also be estimated with 31P NMR, together with the unidirectional rates of phosphate turnover, using the method of saturation transfer. Changes in intracellular electrical potential will be evaluated in separated tubules and cells before and after stimulation of transport, using fluorescent and radioactive probes. Alterations in ouabain binding of rectal gland cells will be assessed before and after secretion is stimulated. The possibility of interchange of pump enzyme between cell interior and plasma membranes by the mechanisms of exocytosis and of membrane internalization will be investigated. The possible role of protein kinase in activating cell membrane Na-K-ATPase will also be explored in direct experiments using partially purified enzyme and protein kinase prepared from rectal gland tissue.
还原型谷胱甘肽在保护肾功能和结构中的作用 将使用分离的灌注大鼠肾脏作为模型进行研究。 我们有初步证据表明谷胱甘肽消耗可能会产生病变 局限于与不成比例相关的粗升肢 注意力集中能力下降。 特异性抑制 GSH 合成 将采用多种方式去除细胞中的 GSH,并且 尝试将结构损伤的组织学证据与 细胞和功能改变,组织中硫醇水平降低, 使用组织化学和酶法来评估这一点。 道路 当跨上皮运输发生时,Na-K-ATP酶被激活 将在离体灌注软骨鱼直肠中研究增加的 腺。 将无创地监测细胞内的钠 依次通过使用核磁共振的新技术(23Na 核磁共振)。 磷中间体的稳态水平也将 用 31P NMR 以及磷酸盐的单向速率估计 周转,采用饱和转移的方法。 变化 将在分离的小管中评估细胞内电位 以及运输刺激之前和之后的细胞,使用荧光和 放射性探针。 直肠腺细胞哇巴因结合的改变 将在刺激分泌之前和之后进行评估。 可能性 细胞内部和质膜之间泵酶的交换 胞吐作用和膜内化的机制将是 调查了。 蛋白激酶在激活细胞中的可能作用 膜 Na-K-ATP 酶也将在直接实验中进行探索 从直肠腺制备的部分纯化的酶和蛋白激酶 组织。

项目成果

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