繁殖困難な野生由来系統マウスのための個体作製方法の開発

开发一种生产难以繁殖的野生小鼠品系个体的方法

基本信息

批准号：
22KJ0361
负责人：
渡邉奈穂美
金额：
$ 1.41万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、野生由来マウス系統の保存を目的とした核移植ES細胞に関する研究に取り組んでいる。1年目までに亜種野生由来マウス由来核移植ES細胞を用いた個体作出、および異種野生由来マウスからの核移植ES細胞の樹立に成功した。そこで２年目は、①樹立した２ラインの異種野生由来マウス由来核移植ES細胞の品質評価とキメラマウスの作出、②細胞ラインの増加を目的とした体細胞クローン実験の2本の柱を軸に研究を進めた。①については、品質評価として染色体数の計測とテラトーマ形成能試験を行った。染色体数の計測では２ラインともに正常な染色体数を保持した細胞が60％以上を示した。またテラトーマ形成能試験では、1/2ラインでテラトーマが形成され、現在は組織学的観察を行なっている。さらに２ラインからキメラマウスを作出し、野生色（アグーチ）が混ざった毛色を持つキメラマウスを獲得した。交配試験を行った結果、1/2ラインのグループで野生色の産子を獲得でき、生殖系列への分化が確認された。②については、異種野生由来マウス由来核移植ES細胞の樹立を試みた。樹立に成功した手法のほかに、既報の手法を用いて実験を行ったが、新たな核移植ES細胞ラインを増やすことはできなかった。

在这项研究中，我们正在进行核移植 ES 细胞的研究，以保存野生小鼠品系。到第一年，我们成功地使用来自亚种野生小鼠的核移植 ES 细胞产生了个体，并成功地建立了来自异种野生小鼠的核移植 ES 细胞。因此，第二年，我们将重点关注两个支柱：（1）对已建立的两个异种野生小鼠核移植ES细胞系的质量评估和嵌合小鼠的产生，以及（2）旨在增加细胞系的数量。对于①，我们进行了染色体数目测定和畸胎瘤形成能力测试作为质量评价。染色体数量的测量表明，两个细胞系中超过 60% 的细胞具有正常的染色体数量。另外，在畸胎瘤形成能力测试中，1/2线处形成了畸胎瘤，目前正在进行组织学观察。此外，从两个品系中创建了嵌合小鼠，并获得了毛色与野生颜色混合的嵌合小鼠（agouti）。交配测试的结果是，我们能够在 1/2 系组中获得野生颜色的后代，确认分化为种系。关于②，我们尝试建立源自异种野生小鼠的核移植ES细胞。除了已经成功建立的方法外，我们还使用以前报道的方法进行了实验，但我们无法增加新的核移植ES细胞系的数量。