How angiogenic factor induces immunosuppressive cells to tumor microenvironment

血管生成因子如何诱导免疫抑制细胞进入肿瘤微环境

基本信息

批准号：
22KJ0818
负责人：
横田翔平
金额：
$ 1.09万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ0818/
关键词：
MDSCs CX3CL1 VEGF Canine Tumor

项目摘要

本研究では犬の移行上皮癌を対象として、細胞株、担癌モデルマウス、腫瘍症例犬を用いて、血管内皮細胞成長因子 (VEGF) とケモカインの一つであるCX3CL1を介した骨髄由来免疫抑制細胞 (MDSCs) の腫瘍内浸潤機構について研究を進めている。研究計画に記載した細胞株を用いた検証は概ね順調に進行している。現在までに、犬の移行上皮癌細胞株がVEGFおよびVEGFの受容体を発現することを確認した。そして、移行上皮癌細胞株にVEGFリコンビナントタンパクを添加すると、CX3CL1のタンパク質発現が上昇することを見出した。この結果から、犬の移行上皮癌では、VEGFによりCX3CL1産生が制御されている可能性が示唆された。また、ゲノム編集により、移行上皮癌細胞株のVEGF受容体およびCX3CL1をノックアウトした細胞株を作製した。今後はこれらのノックアウト細胞株をヌードマウスに移植した担癌モデルマウスを用いて検証を進めていく予定である。大学病院に来院した移行上皮癌症例を用いた検証も進めている。これまでに、健常犬と比較して移行上皮癌症例では尿中のVEGFおよびCX3CL1濃度が上昇していることを見出した。また、免疫組織化学により、CX3CL1は尿中だけでなく腫瘍組織でも高発現しており、発現が高いグループでは予後が有意に悪いことを見出した。これらの結果から、VEGFおよびCX3CL1は細胞株だけでなく、実際の臨床症例のレベルにおいても病態に寄与している可能性が示唆された。今後は担癌モデルマウスを用いた検証を行うと共に腫瘍症例を使用した評価を進めていく。

在这项研究中，我们重点关注犬移行细胞癌，并使用细胞系、荷瘤模型小鼠和荷瘤狗研究了血管内皮生长因子 (VEGF) 和趋化因子 CX3CL1 介导的骨髓源性免疫抑制。正在进行肿瘤内侵袭细胞（MDSC）机制的研究。使用研究计划中描述的细胞系进行的验证总体进展顺利。迄今为止，我们已经证实犬移行细胞癌细胞系表达VEGF和VEGF受体。他们还发现，当将VEGF重组蛋白添加到移行细胞癌细胞系中时，CX3CL1蛋白表达增加。这些结果表明，在犬移行细胞癌中，CX3CL1 的产生可能受到 VEGF 的调节。此外，我们通过基因组编辑敲除 VEGF 受体和 CX3CL1，创建了移行细胞癌细胞系。未来，我们计划利用荷瘤模型小鼠，将这些敲除细胞系移植到裸鼠体内进行验证。我们还利用在大学医院就诊的移行细胞癌病例进行验证。我们之前发现，与健康狗相比，移行细胞癌病例中尿 VEGF 和 CX3CL1 浓度升高。此外，免疫组化显示CX3CL1不仅在尿液中高表达，而且在肿瘤组织中也高表达，且高表达组的预后明显较差。这些结果表明，VEGF 和 CX3CL1 可能不仅在细胞系中而且在实际临床病例中也与病理状况有关。未来我们将利用荷瘤模型小鼠进行验证，并利用肿瘤病例进行评估。