in vivo ライブイメージングを用いた甲殻類の脱皮による形態形成機構の解明

利用体内实时成像阐明甲壳类动物蜕皮的形态发生机制

基本信息

批准号：
22KJ1542
负责人：
足立晴彦
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Keio University (2023)Nagoya University (2022)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ1542/
关键词：
ミナミヌマエビ形態形成

项目摘要

本年度は、計画していた研究に必要な実験用ミナミヌマエビの飼育系の立ち上げからスタートした。年度の途中、所属部屋の改修工事に伴う引越し作業で飼育していたエビが全滅してしまうという予想外のアクシデントがあったものの、トラブルシューティングを行い、最大24の卵について孵化後の時系列を同時に追える系の確立、位相差法や蛍光試薬を用いた成体における24時間を超える長時間のライブイメージング系の確立を行った。ライブイメージングでは、エビ尾組織全体の細胞核に加えて、神経細胞、血球系細胞、血管といった組織を染め分けることにも成功し、今後その動態を解析していきたい。また、本研究の目的である脱皮による形態形成の解析において特に重要となりうる、脱皮間で大きく形を変化させる器官の選定が完了した。具体的には、孵化後一回目の脱皮で形を大きく変化させる尾である。今後、幼生期においても、成体と同様に長時間のライブイメージング系を確立していきたい。また、エビにおけるRNAiの系も確立し、形態形成にに異常が生じるRNAiスクリーニングも同時並行で行っている。その中で、本研究の目的とは異なるが、面白い現象が見つかってきたので、時間に余裕があれば、そちらにも少しエフォートを割ければと考えている。

今年，我们首先建立了计划研究所需的南方虾实验养殖系统。在本财年中期，发生了一场意外事故，由于我们房间的装修工程，我们在搬家时所有的虾都被消灭了，但我们排除了故障，并能够记录孵化的时间序列我们使用相差法和荧光试剂建立了一个对成人进行超过 24 小时的同步跟踪系统和实时成像系统。除了整个虾尾组织的细胞核外，实时成像还成功区分了神经细胞、血细胞和血管等组织，我们希望在未来分析它们的动态。此外，我们还完成了在蜕皮过程中形状发生显着变化的器官的选择，这对于分析蜕皮导致的形态发生可能特别重要，这也是本研究的目的。具体来说，在孵化后的第一次蜕皮期间，尾巴的形状会发生显着变化。未来，我们希望建立一个针对幼虫阶段和成虫阶段的长期实时成像系统。我们还在虾体内建立了RNAi系统，同时正在进行形态发生异常的RNAi筛查。在这个过程中，我发现了一个有趣的现象，虽然与本次研究的目的有所不同，所以如果有时间，我愿意为此付出一些努力。