小児抗癌剤障害歯の長期保存の可能性―歯根障害モデルを用いた予後の解析―

长期保存儿童抗癌药物损伤牙齿的可能性 - 使用牙根疾病模型进行预后分析 -

基本信息

批准号：
26463110
负责人：
三富智恵
金额：
$ 3.08万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-26463110/
关键词：
歯の形成障害抗がん剤歯根ヘルトビッヒの上皮鞘象牙芽細胞

项目摘要

歯根形成期におけるアルキル化抗がん剤による歯根形成障害の機序を形態学的に解析した。歯根形成障害の経時的変化の解析を目的に、実験モデルとして生後15日齢のラットにBusulfan7.5ml/kgを腹腔内投与し、投与後1日、3日、5日、9日、12日後の組織像を免疫組織学的に、特にヘルトビッヒの上皮鞘、骨様象牙質の形成機序に焦点を当てて観察した。Busulfan投与後3日目に根尖部の象牙芽細胞の配列にわずかな乱れが認められ、5日目に骨様象牙質の形成がみられた。9、12日目では顕著な骨様硬組織形成が観察され、根尖部の閉鎖傾向が認められた。Nestin免疫染色では、投与後5日目の骨様象牙質の細胞成分が免疫陽性を示し、9、12日目には多数のNestin陽性細胞が骨様象牙質に埋入されてた。サイトケラチン14免疫染色では、投与後3日目にヘルトビッヒの上皮鞘の配列の乱れが観察され、5、9、12日目では細胞数の著しい減少を認めた。しかしながら、connexinの発現はヘルトビッヒ上皮鞘の崩壊後も持続していた。Laminin免疫染色では、5日目まで基底膜構造は断裂することなく存在していたが、9日目には細胞数の減少とともに萎縮していた。H27年度では、ヘルトビッヒの上皮鞘の消失がどのように起こるのかを明らかにするためにTUNNEL 法を用いてアポトーシスの有無を観察した。TUNNEL陽性細胞はBu投与後3日から出現し、5日目には根尖部の多数の細胞に観察された。そして9日目にはほとんど消失していた。これらの結果から、Busulfan投与後5日以内に根尖部の細胞にアポトーシスが生じ、その結果ヘルトビッヒ上皮鞘の崩壊が始まり、その後、象牙芽細胞の配列が乱れ、骨様象牙質の形成によって、根尖孔の早期縮小、歯根短縮が生じることが示唆された。

我们从形态学上分析了牙根形成阶段烷化抗癌药物对牙根形成的损害机制。为了分析牙根形成障碍随时间的变化，对作为实验模型的15日龄大鼠以及给药后1、3、5、9和12天腹腔注射7.5ml/kg白消安。我们通过免疫组织学观察了组织学图像，重点研究了赫特维希上皮鞘和类骨质牙本质的形成机制。给予白消安后第3天，在根尖部的成牙本质细胞的排列中观察到轻微的紊乱，第5天，观察到骨样牙本质的形成。第9天和第12天，观察到明显的骨样硬组织形成，并且心尖趋于闭合。 Nestin免疫染色显示给药后第5天骨样牙本质细胞成分呈免疫阳性，第9天和第12天骨样牙本质内包埋大量Nestin阳性细胞。细胞角蛋白14免疫染色显示，给药后第3天，赫特维希上皮鞘排列紊乱，第5、9、12天细胞数量明显减少。然而，即使在 Hertwig 上皮鞘塌陷后，连接蛋白的表达仍持续存在。层粘连蛋白免疫染色显示，基底膜结构直到第 5 天都保持完整，但在第 9 天随着细胞数量的减少而萎缩。 2017财年，我们使用TUNNEL法观察细胞凋亡的有无，以明确赫特维希上皮鞘是如何消失的。 Bu施用后第3天开始出现TUNNEL阳性细胞，第5天在根尖处观察到许多细胞。到了第9天，它几乎消失了。这些结果表明，在施用白消安后5天内，根尖细胞发生凋亡，赫特维希上皮鞘开始崩解，随后成牙本质细胞排列紊乱，形成骨状牙本质。提示发生了根尖孔的早期缩小和牙根的缩短。