呼吸器粘膜組織における記憶ヘルパーT細胞維持機構の解明

阐明呼吸道粘膜组织记忆辅助T细胞维持机制

基本信息

批准号：
15K08521
负责人：
篠田健太
金额：
$ 3.16万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

慢性アレルギー性気道炎症において肺組織で維持される有害な病原性記憶ヘルパーT細胞の維持機構に着目し、研究を行った。われわれは、抗原特異的エフェクターヘルパーT細胞をマウスに移入し抗原を肺に投与することで、肺組織の微小環境変化により、誘導性気管支関連リンパ組織（iBALT）を誘導する系を確立し、その組織構造中に大部分の記憶ヘルパーT細胞が局在していることを明らかにしてきた。IL-7の発現を組織学的に検出可能なIL-7-GFPノックインマウスを用いた実験結果から、iBALT中に多くのIL-7産生細胞が局在し、記憶ヘルパーT細胞の大部分はIL-7産生細胞と接着して維持されていることを見出した。IL-7レセプターのコンディショナルノックアウトマウス由来の記憶ヘルパーT細胞を誘導した後に、薬剤によりIL-7レセプターを欠失させたところ、肺において維持される記憶ヘルパーT細胞の数が顕著に減少した。このことから記憶ヘルパーT細胞はiBALT中でIL-7依存的に維持されていることが明らかとなった。さらに、iBALT内における記憶ヘルパーT細胞のニッシェを詳細に解析する目的で、IL-7-GFPノックインマウスの肺からGFPの発現を指標にIL-7産生細胞をフローサイトメーターにより単離した。cDNAマイクロアレイを用いた網羅的遺伝子発現解析を行ったところ、GFP陽性細胞ではリンパ管内皮細胞マーカー（Prox1, Pdpn, Nrp2, Flt4, Angptl4）の発現がGFP陰性細胞と比較して顕著に高いことが明らかとなった。さらに、免疫染色法を用いた組織学的解析からGFP陽性細胞は管腔状の構造を形成し、リンパ管内皮細胞特異的マーカーで共染色されることが明らかとなった。以上の結果から、慢性炎症肺においてリンパ管内皮細胞がIL-7を産生し記憶ヘルパーT細胞のニッシェを形成していることが明らかとなった。

我们的研究重点是慢性过敏性气道炎症期间肺组织中维持的有害致病性记忆辅助 T 细胞的维持机制。通过将抗原特异性效应辅助 T 细胞转移到小鼠体内并将抗原注射到肺部，我们建立了一个系统，通过改变肺组织的微环境来诱导诱导型支气管相关淋巴组织 (iBALT)。细胞位于组织结构内。使用可在组织学上检测到IL-7表达的IL-7-GFP敲入小鼠的实验结果表明，许多产生IL-7的细胞位于iBALT中，并且大多数记忆辅助T细胞位于iBALT中。发现细胞与产生IL-7的细胞保持粘附。从IL-7受体条件性敲除小鼠中诱导记忆辅助T细胞后，当使用药物删除IL-7受体时，肺部维持的记忆辅助T细胞数量显着减少。这些结果表明，记忆辅助 T 细胞以 IL-7 依赖性方式维持在 iBALT 中。此外，为了详细分析 iBALT 中记忆辅助 T 细胞的生态位，使用流式细胞仪以 GFP 表达作为指标，从 IL-7-GFP 敲入小鼠的肺部分离产生 IL-7 的细胞。使用cDNA微阵列进行综合基因表达分析表明，淋巴内皮细胞标记物（Prox1、Pdpn、Nrp2、Flt4、Angptl4）的表达在GFP阳性细胞中显着高于GFP阴性细胞。此外，使用免疫染色的组织学分析表明，GFP 阳性细胞形成管腔样结构，并与淋巴管内皮细胞特异性标记物共染色。这些结果表明，淋巴内皮细胞产生 IL-7，并在慢性发炎的肺部形成记忆辅助 T 细胞的生态位。

项目成果

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专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Application of LP-iDOPE for melanoma therapy

LP-iDOPE在黑色素瘤治疗中的应用

DOI：
发表时间：
2015
期刊：
影响因子：
0
作者：
Suganami; A.; Shinoda; K.; Suzuki; A.; Saito; K.; Okamoto; Y.; Motohashi; S.; Nakayama; T.; Shirasawa; H.;Tamura; Y
通讯作者：
Y

Pathogenic Th2 (Tpath2) cells in airway inflammation

气道炎症中的致病性 Th2 (Tpath2) 细胞