骨吸収因子に着目したエナメル上皮腫治療の新戦略

关注骨吸收因子的成釉细胞瘤治疗新策略

• 批准号: 22K10227
• 负责人: 松村 達志
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K10227/
• 关键词: 歯原性腫瘍; 骨吸収因子

申請者らはこれまでに歯胚発生過程に関する研究を行い、その結果、発育歯胚および歯胚器官培養において歯胚内部への周囲骨侵入を歯原性上皮が発現する副甲状腺ホルモン関連ペプチド（PTHrP）が阻害しているという研究成果を得ている。さらに、エナメル上皮腫における腫瘍細胞の骨侵入について組織学的検討を行った結果、エナメル上皮腫による顎骨吸収では破骨細胞がほとんど観察されず、他の腫瘍とは異なる骨吸収機構が存在する可能性があるとの研究成果を得ている。そこで本申請課題では、エナメル上皮腫での骨侵入因子の発現阻害により周囲骨の病巣内への侵入を促し、腫瘍の根治のみならず骨造成促進するという外科的手法を用いないエナメル上皮腫の新規治療法の開発に向けた基礎的研究を行う。2022年度は本申請課題に使用する細胞樹立と腫瘍実質と間質の相互作用の確認を行う計画であった。・腫瘍実質、間質細胞樹立：手術材料からエナメル上皮腫を無菌的に摘出し、細切後Collagenase とDyspase（各１mg/ml）溶液にて37℃、１時間処理を行い、その後10％FBS D-MEM培地で培養する。エナメル上皮腫細胞と間質細胞はシャーレとの接着性の強さの違いを利用し、分離した。腫瘍間質細胞は分離後、単独にて培養および継代可能であったが、腫瘍実質細胞は単独培養は可能であったが、継代できなかった。・腫瘍実質と腫瘍間質の相互作用確認：手術材料から樹立したエナメル上皮腫腫瘍細胞の代替としてAM-1を使用し、石灰化培地で培養した間質コントロール細胞（KUSA細胞）をコラーゲンゲル中で3D培養すると、生体内に類似した腫瘍胞巣形成が観察された。以上のように2022年度は本申請課題の基礎となる腫瘍間質細胞樹立とAM-1とKUSA細胞（腫瘍間質コントロール細胞）を用いた３D培養による腫瘍実質と腫瘍間質の相互作用の実験系確立を行なった。

申请人迄今为止对牙胚发育过程进行了研究，结果发现牙源上皮表达的甲状旁腺激素相关肽在牙胚发育过程中抑制周围骨侵入牙胚内部。研究结果表明，PTHrP) 受到抑制。此外，通过对成釉细胞瘤肿瘤细胞骨侵袭的组织学检查，我们发现在成釉细胞瘤引起的颌骨吸收中几乎没有观察到破骨细胞，这表明可能存在与其他肿瘤不同的骨吸收机制。结果表明，有一个因此，在本申请中，我们旨在通过抑制成釉细胞瘤内骨侵袭因子的表达，促进周围骨侵入病灶，从而在不手术的情况下治疗成釉细胞瘤，从而不仅彻底治愈肿瘤，而且促进骨形成进行基础。研究旨在开发新的治疗方法。 2022 年，计划建立用于该应用的细胞并确认肿瘤实质和基质之间的相互作用。・建立肿瘤实质和基质细胞：在无菌条件下从手术材料中取出成釉细胞瘤，切成小块，并用胶原酶和 Dyspase（各 1 mg/ml）在 37°C 下处理 1 小时，然后用 10% FBS 处理。在 D-MEM 培养基中培养。利用成釉细胞瘤细胞和基质细胞与培养皿的粘附强度的差异来分离它们。分离后，肿瘤基质细胞可以单独培养和传代，而肿瘤实质细胞可以单独培养，但不能传代。・确认肿瘤实质和肿瘤基质之间的相互作用：使用 AM-1 作为由手术材料建立的成釉细胞瘤肿瘤细胞的替代品，将在矿化培养基中培养的基质对照细胞（KUSA 细胞）置于胶原凝胶中，在 3D 中培养时，肿瘤。观察到与体内相似的巢形成。如上所述，到2022年，该应用项目的基础将是建立肿瘤基质细胞，并利用AM-1和KUSA细胞（肿瘤基质对照细胞）进行3D培养，进行肿瘤实质和肿瘤基质之间相互作用的实验。制度建立。