頸部リンパ節を起点とした動注免疫療法による進行口腔癌に対する新規治療戦略の確立

从颈部淋巴结开始动脉灌注免疫治疗晚期口腔癌新治疗策略的建立

• 批准号: 22K10181
• 负责人: 佐久間 要
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: The Nippon Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K10181/
• 关键词: PD-L1; 局所少量投与; CD８; 超選択的動注化学療法; 免疫療法; CTL

本研究の目的は，進行口腔癌に対して免疫チェックポイント阻害剤(ICI)である抗PD-L1抗体を浅側頭動脈から挿入した超選択的動注カテーテルより，腫瘍部と頸部リンパ節へ直接少量投与することで，CTL（細胞傷害性T細胞）の頸部リンパ節を起点とした再循環を誘起する新規治療法の確立である. 蛍光遺伝子であるルシフェラーゼを導入した高転移マウス口腔扁平上皮癌を, 同系統マウス舌へ移植し，頸部転移リンパ節マウスモデルを作製する. 腫瘍の局在を明らかにした上で，全身投与と局所少量投与抗CD4抗体と抗PD-L1抗体を頸静脈から局所少量投与を行うことで，リンパ節でのCTLの活性・増殖を確認可能とする. 申請者は，進行口腔癌における免疫動注療法の基礎的実験として，抗CD4/PD-L1抗体の単剤，併用低用量の局所投与を行う. また，舌癌，所属リンパ節，血液中の免疫応答および抗腫瘍効果を解析し明らかにする. 現在予備実験で, PD-L1の局所投与実験として，マウス背部モデルを用いて抗PD-L1抗体薬を低用量局所投与と通常量全身投与を行い抗腫瘍効果および摘出腫瘍を用いて免疫学的に検索を行っている．方法は，マウス頬粘膜OSCC株(Sq-1979)および抗マウスPD-L1抗体を使用した.Sq-1979をマウス背部へ移植後,Control群と低用量局所投与群,全身通常量投与群に群分けし,抗腫瘍効果および体重変動を確認した．さらに，免疫染色およびRT-PCRにて腫瘍組織を確認し，real-time PCR法にて発現量の比較を行った.抗PD-L1抗体局注群および全身群は,Control群と比較し有意に抗腫瘍効果を認め(p＜0.01),また3群とも大きな体重変動は認めなかった. 全身通常量投与と同程度の抗腫瘍効果が得られる可能性が示唆された.

本研究的目的是通过使用插入颞浅动脉的超选择性动脉输注导管向肿瘤区域和颈部淋巴结施用抗 PD-L1 抗体（一种免疫检查点抑制剂 (ICI)）来治疗晚期口腔癌。一种新的治疗方法，通过将少量直接注射到转染荧光基因鳞状细胞癌的高度转移小鼠的口腔中，诱导从颈部淋巴结开始的CTL（细胞毒性T细胞）再循环，移植到同种小鼠的舌头中，建立颈部转移淋巴结小鼠模型。明确肿瘤的定位后，从颈静脉局部给予全身和局部小剂量的抗CD4抗体和抗PD-L1抗体。通过少量给药，可以确认淋巴结中的CTL活性和增殖情况，联合小剂量局部给药。此外，我们还将分析和阐明舌癌、区域淋巴结和血液中的免疫反应和抗肿瘤作用。目前，在初步实验中，我们正在利用小鼠背部模型进行抗PD-L1抗体的局部给药实验。使用切除的肿瘤进行免疫学研究低剂量局部给药和正常剂量全身给药的抗肿瘤作用。该方法使用小鼠颊粘膜OSCC株（Sq-1979）和抗小鼠PD-L1抗体，将Sq-1979移植到小鼠背部后，分别为对照组、低剂量局部给药组和全身正常组。确认了给药组的抗肿瘤作用和体重变化。此外，通过免疫染色和RT-PCR确认肿瘤组织，并通过实时PCR比较表达水平。抗PD-L1抗体局部注射组和全身组与对照组相比显示出显着差异。在患者中观察到效果（p<0.01），并且在所有三组中均未观察到重大的体重变化，这表明该药物可能具有与正常剂量全身给药所达到的抗肿瘤效果相当的效果。