Elucidation of the mechanisms underlying drug-resistance and development of therapeutic strategy of refractory cervical cancer using patient-derived organoids

利用患者来源的类器官阐明耐药性机制并制定难治性宫颈癌的治疗策略

基本信息

批准号：
22K09607
负责人：
海老沢桂子
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Chiba Cancer Center (Research Institute)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

患者由来オルガノイド(PDO)は元の腫瘍の特徴を保持しているとされるが、子宮頸がん研究への応用例は非常に少ない。本研究では子宮頸がんPDOを樹立し、難治性子宮頸がんの治療抵抗性機構解明および治療戦略の構築を目的とする。本年度は難治性で発生頻度の低い胃型粘液性癌3例から患者由来オルガノイド(PDO) 6株を樹立した。その内訳は、2例は原発巣のみの計2株、１例は原発巣およびリンパ節転移巣から計4株である。これまでに胃型粘液性癌由来PDOの報告は皆無であり、貴重なリソースとなることが期待される。過去に樹立済みおよび今回新たに樹立した子宮頸がんPDO 18株を用いて抗がん剤5種（パクリタキセル、カルボプラチン、シスプラチン、ネダプラチン、塩酸イリノテカン（活性代謝物SN-38））に対する感受性を評価した。腺癌由来PDOは扁平上皮癌由来PDOに比べ抵抗性の傾向を示し、腺癌の組織亜型においても胃型粘液性癌由来PDOは通常型内頸部腺癌由来PDOに比べ抵抗性であった。このことから、樹立したPDOが臨床での病態を再現していることが示唆された。また、同一症例から樹立した複数のPDO間で薬剤感受性が異なる場合もあり、腫瘍の空間的多様性を異なる採取部位由来のPDOが反映していることが示唆された。子宮頸がんPDOを卓上走査型電子顕微鏡で観察したところ、組織型だけでなく症例間においても超微細構造に違いがみられることが明らかとなった。樹立した子宮頸がんPDOライブラリーが元の腫瘍の特徴をどの程度保持しているかを確認するため、病理組織学的解析、409のがん関連遺伝子に対するターゲットシーケンスによる遺伝子異常の検索、ハイリスク型HPV感染の有無になどついての評価を開始した。

据说患者来源的类器官（PDO）保留了原始肿瘤的特征，但在宫颈癌研究中的应用很少。本研究旨在建立宫颈癌PDO，阐明难治性宫颈癌的治疗耐药机制，制定治疗策略。今年，我们从三例胃型粘液癌病例中建立了 6 个患者来源的类器官（PDO）系，这种癌很难治疗且很少发生。其中，2例仅有原发肿瘤，共2株，1例有原发肿瘤及淋巴结转移，共4株。迄今为止，尚未见来自胃粘液癌的PDO的报道，预计它将成为一种宝贵的资源。使用 18 种先前建立的和新建立的宫颈癌 PDO 菌株评估了对 5 种抗癌药物（紫杉醇、卡铂、顺铂、奈达铂、盐酸伊立替康（活性代谢物 SN-38））的敏感性。源自腺癌的PDO显示出比源自鳞状细胞癌的PDO更耐药的趋势，并且即使在腺癌的组织学亚型中，源自胃粘液癌的PDO也比源自传统宫颈内腺癌的PDO更耐药。这表明所建立的 PDO 再现了临床病理学。此外，同一病例建立的多个 PDO 之间的药物敏感性可能不同，这表明肿瘤的空间多样性反映在来自不同收集地点的 PDO 中。当使用台式扫描电子显微镜观察宫颈癌PDO时，发现病例之间不仅组织学类型存在差异，而且超微结构也存在差异。为了确认建立的宫颈癌PDO文库在多大程度上保留了原始肿瘤的特征，我们进行了组织病理学分析，通过对409个癌症相关基因进行靶向测序来寻找遗传异常，并开始对患者进行高风险评估确定他们是否感染HPV。