Regeneration of functional bladder using two-layered bioabsorbable scaffolds with amniotic supernatant and adipose derived stem cells

使用带有羊膜上清液和脂肪干细胞的两层生物可吸收支架再生功能性膀胱

• 批准号: 22K09521
• 负责人: 堀井 常人
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Shiga University of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09521/
• 关键词: 膀胱再生; P(LA/CL); 脂肪由来幹細胞; 生体吸収性; 足場材料; バイオマテリアル; 再生医学; 泌尿器科学; 幹細胞

膀胱組織再生に最適な足場材料を作製するために、P(LA/CL)の重合比率及びエレクトロスピニングの条件設定等をまず検討した。重合比はPLA=100%、LA:CL=80:20、70:30、50:50、PCL=100%の5種類を使用した。エレクトロスピニング条件はトラバース速度100～250mm/min、回転速度100～150rpm、シリンジ速度0.05～0.1mm/min、電圧5～10kVの範囲で設定した。溶媒には1,1,1,3,3,3-ヘキサフルオロプロパノールを使用した。濃度は10～15%の範囲で調製し使用した。結果、重合比がPLA=100%やPLC=100%では、材料そのものの伸縮性が非常に低く、LA:CL=70:30が最も伸縮性の高い材料となった。また、P(LA/CL)とエタノールとを同時に噴射することによって、より繊維間隔の広い材料を作製することに成功した。そこで、次に最適なLA:CL=70:30の材料を使用し、ラットの皮下ポケットに埋植し、組織形成について評価を行った。その結果、3週間後には繊維内部にまで細胞浸潤が認められ、血管の形成を複数確認することができた。さらに、P(LA/CL)70/30の材料を使用して、溶液を凍結乾燥し、スポンジを作製することに成功した。このスポンジ材料でラットの皮下埋植を行ったところ、3週間で繊維内部まで細胞浸潤と血管形成が認められていた。膀胱組織への使用はスポンジ状が厚みもあり、血管の形成が豊富であるため最適であることが考えられた。

为了创建用于膀胱组织再生的最佳支架材料，我们首先研究了 P(LA/CL) 的聚合比例和静电纺丝条件。使用五种聚合比例：PLA=100%、LA:CL=80:20、70:30、50:50和PCL=100%。静电纺丝条件设定为：横动速度100～250mm/min、旋转速度100～150rpm、注射器速度0.05～0.1mm/min、电压5～10kV。使用1,1,1,3,3,3-六氟丙醇作为溶剂。配制使用浓度为10-15%。结果，当聚合比例为PLA=100%或PLC=100%时，材料本身的弹性很低，而LA:CL=70:30是弹性最高的材料。此外，通过同时注入P(LA/CL)和乙醇，我们成功地创造了一种具有更宽纤维间距的材料。因此，我们使用了次最合适的材料LA:CL=70:30，将其植入大鼠的皮下袋中，并评估其组织形成。结果，3周后，在纤维内部观察到细胞浸润，并且确认了多个血管的形成。此外，我们通过使用 P(LA/CL)70/30 材料冷冻干燥溶液，成功制造了海绵。当这种海绵材料植入大鼠皮下时，3周内观察到纤维内部的细胞浸润和血管形成。人们认为它最适合用于膀胱组织，因为它厚实、海绵状且具有丰富的血管。

项目成果

Regeneration of Functional Bladder Using Cell-seeded Amnion and P(LA/CL) Scaffolds

使用细胞接种的羊膜和 P(LA/CL) 支架再生功能性膀胱

• DOI: 10.1089/ten.tea.2022.0078
• 发表时间: 2022
• 影响因子: 4.1
• 作者: Horii Tsunehito;Jonin Kazuyoshi;Kageyama Susumu;Yoshida Tetsuya;Kobayashi Kenichi;Minato Hiroshi;Ueda Joe;Tsujimoto Hiroyuki;Hagiwara Akeo;Ichikawa Hiroshi;Kawauchi Akihiro
• 通讯作者: Kawauchi Akihiro