セボフルランにより最早に賦活されるカレハ島ニューロン群の性質と影響についての解析

七氟烷激活的Calleja岛神经元的特性和作用分析

• 批准号: 22K09028
• 负责人: 飯島 典生
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: International University of Health and Welfare
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09028/
• 关键词: 吸入麻酔; sevoflurane; 麻酔メカニズム; カレハ島; ｃFos; 順行性トレーサー; 麻酔; cFos; NOS; 神経投射

全身麻酔は長年にわたり外科手術の発展を支えてきたが、その作動メカニズムに関してはいまだに解明が進んでいない。全身麻酔薬の作動メカニズムを探る目的で、吸入麻酔薬sevoflurane投与１時間後にラット脳を固定して、神経賦活マーカーcFosの発現を免疫組織化学により検索したところ、前脳カレハ島に脳内で最も早くクラスター状のcFos免疫陽性反応を検出した。このcFos陽性領域は一酸化窒素合成酵素の活性領域と重複することを明らかとした。さらにカレハ島に発現されると報告されているマーカーとcFosの二重染色により、賦活されるニューロンのcharacterizeを現在試みている。カレハ島cFos発現領域に順行性トレーサーBA10000を微量注入して、同領域ニューロンの投射先を探索したところ、同側性にマイネルト基底核、外側視床下部、手綱核にトレーサーを含む神経線維が検出された。この結果によりsevofluraneによりカレハ島のニューロンが賦活され、マイネルト基底核、外側視床下部、手綱核へとその影響が波及する可能性が見出された。今後、投射領域を特徴つけるマーカーと順行性トレーサーとの二重染色を計画している。またこれらの領域に逆行性トレーサーを微量注入して、カレハ島に逆行輸送されたトレーサーを含む細胞体とcFosを含む細胞核の二重染色性を確認することによって、麻酔により賦活される神経ネットワークの可視化を計画している。

尽管全身麻醉多年来一直支持外科手术的发展，但对其操作机制仍知之甚少。为了探究全身麻醉药的作用机制，在给予吸入麻醉药七氟醚1小时后固定大鼠大脑，通过免疫组织化学检查神经激活标志物cFos的表达，早期检测到一簇cFos免疫阳性反应。结果表明，该 cFos 阳性区域与一氧化氮合酶的活性区域重叠。此外，我们目前正在尝试通过 cFos 和据报道在卡列哈岛表达的标记物的双重染色来表征激活的神经元。当我们将少量顺行示踪剂 BA10000 注射到 Calleja 岛的 cFos 表达区域并搜索该区域神经元的投射目的地时，在同侧的下丘脑外侧 Meynert 基底节中检测到含有示踪剂的神经纤维，和缰核就完成了。这些结果表明七氟烷激活卡列哈岛的神经元，并且其作用扩散到迈纳特基底神经节、下丘脑外侧和缰核。将来，我们计划使用表征投影区域的标记和顺行示踪剂进行双重染色。此外，通过将逆行示踪剂显微注射到这些区域并确认含有示踪剂的细胞体和逆行运输至卡列哈岛的含有cFos的细胞核的双重染色，我们能够研究麻醉激活的神经网络规划的可视化。 。