末梢血・門脈血中microRNA解析による臓器別転移機序の解明と個別化治療の開発

通过外周血和门静脉血中的microRNA分析阐明器官特异性转移机制并开发个体化治疗

• 批准号: 22K08823
• 负责人: 高橋 秀典
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08823/
• 关键词: 膵癌; 肝転移; 肺転移; micro RNA; microRNA; エクソソーム

本研究で検証を目指している仮説は「膵癌の肝転移・肺転移の成立を特徴付ける分子生物学的メカニズムを明らかにすることにより，それぞれの転移の特徴を考慮した効果的な治療法・予防法が開発できるか」である．上記仮説の検証のために以下の研究・実験計画を遂行中である：①膵癌に対する膵切除術時と切除後1ヶ月経過時における末梢血・門脈血エクソソーム内のmRNA/microRNA（miRNA） profileの変化を再発形式と関連付けて解析することにより，特に肝・肺転移の成立に特異的な mRNA/miRNAを同定する．②同定されたmRNA/miRNAの肝・肺転移巣の切除標本における検討，③in vitroの実験によるこれらの遺伝子の機能解析を通して，肝・肺転移の成立に特徴的なメカニズムの解明を目的とする．これまでに術後肝転移症例（n=4），肺転移症例（n=4），無再発症例（n=4）における手術時の末梢血と門脈血からexosomeを抽出し，exosome内miRNA microarrayを施行した．その結果，門脈血において肝転移，肺転移症例で発現が上昇しているmiRNAをそれぞれ18，31種類同定した．これらの内，肝転移のみに認められたものは9種類であった．末梢血において肝転移，肺転移症例で発現が上昇しているmiRNAはそれぞれ11，20種類であった．これらの内，肺転移のみに認められたものは14種類であった．現在，これらを肝転移，肺転移に特徴的なmiRNAの候補としてin vitroでの機能解析実験を進めている段階であり，一部のmiRNAを過剰発現させた膵癌細胞株では遊走能や浸潤脳の亢進を認めている．

我们在这项研究中旨在验证的假设是“通过阐明胰腺癌肝和肺转移形成的分子生物学机制，我们将开发有效的治疗和预防方法，同时考虑到每种转移的特征。” ” “我们可以开发它吗？为了验证上述假设，我们正在进行以下研究/实验计划：①胰腺癌胰腺切除时和胰腺切除后1个月外周血/门血外泌体中的mRNA/microRNA（miRNA）谱通过分析这些与复发类型相关的变化，我们将识别出对肝和肺转移的建立特别特异的 mRNA/miRNA。目的是通过（2）检查肝和肺转移切除标本中已鉴定的 mRNA/miRNA，以及（3）通过体外实验对这些基因进行功能分析，阐明肝和肺转移形成的机制特征。迄今为止，我们已经从术后肝转移（n = 4）、肺转移（n = 4）和非复发患者（n = 4）患者手术时的外周血和门静脉血中提取了外泌体，并发现外泌体内的 miRNA 进行了微阵列分析。结果，我们在门静脉血中分别鉴定了18个和31个在肝转移和肺转移患者中表达增加的miRNA。其中，9 种类型仅在肝转移中观察到。在外周血中，肝转移和肺转移患者中分别有11种和20种miRNA表达增加。其中，14 种仅在肺转移中发现。我们目前正在进行体外功能分析实验，使用这些作为肝转移和肺转移特征的 miRNA 的候选者，我们观察到 miRNA 的增加。