関節リウマチにおけるDNAメチル化ダイナミズムの解明とエピゲノム創薬に向けて

阐明类风湿性关节炎中的 DNA 甲基化动态以及表观基因组药物的发现

基本信息

批准号：
22K08534
负责人：
中野和久
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kawasaki Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

代表的な自己免疫疾患である関節リウマチ（RA）の疾患慢性化、および治療抵抗性の獲得にはエピゲノムの変化が関係する。本研究の目的は、RAの滑膜炎症において中心的役割を果たす炎症性サイトカインTNFによるDNA脱メチル化酵素TET3の発現誘導（TNF-TET3軸）に焦点をあて、ヒトRA患者由来線維芽細胞様滑膜細胞（FLS）におけるヒストン修飾への関与とこれらに基づくFLSの機能の変質、さらにはFLS特異的TET3欠損マウスと hTNF-tgマウスを用いて、TNF-TET3軸がFLSの包括的なエピゲノム変化に果たす役割を明らかにすることである。これまで、RA患者由来FLSを使用し、siRNAを用いてTET3をノックダウンし、TNF刺激の有無で、網羅的に発現遺伝子の差を評価した。TNF刺激の有無、TET3ノックダウンの有無による４群間で発現に有意差が示された遺伝子において、クラスター解析を行ったところ、52個の TET3介在性 TNF誘導性遺伝子が抽出され、好中球の遊走に関与する CXCL8, CXCL5などのCXC-ケモカイン、MYOCD, CNN1, ITGB3などのmigrationに関与する遺伝子、LIFやIL1Bなど炎症をさらに増幅させうる遺伝子、KIT, RELBなどのproto-oncogenes、IFI44LやOAS1, RSAD2などのIFN誘導性遺伝子、TNFAIP3やFADS2などのRAリスクSNP 遺伝子の他、NEFM, SCG2, NTRK3などの神経系に関与する遺伝子が見つかった。これらの検討からはRAのFLSにおいて、TNF- TET3 axisはパンヌスの構成に重要な遺伝子群の発現調節を担うことが示唆された。現在ヒストン修飾との関連を検討中である。

表观基因组的变化与类风湿性关节炎（RA）（一种典型的自身免疫性疾病）的慢性化以及治疗耐药性的获得有关。本研究的目的是重点关注在 RA 滑膜炎症中起核心作用的炎症细胞因子 TNF 诱导 DNA 去甲基化酶 TET3 表达（TNF-TET3 轴），并诱导 DNA 去甲基化酶 TET3（TNF-TET3 轴）的表达。 -TET3 轴）在来自人类 RA 患者的成纤维细胞样细胞中参与滑膜细胞（FLS）的组蛋白修饰以及基于这些的 FLS 功能的改变，以及 FLS 特异性 TET3 缺陷小鼠和本研究的目的是使用 hTNF-tg 小鼠来阐明 TNF-TET3 轴在 FLS 整体表观基因组变化中的作用。之前，我们使用来自RA患者的FLS，使用siRNA敲低TET3，并综合评估有和没有TNF刺激时表达基因的差异。对有和没有TNF刺激以及有和没有TET3敲低的四组之间表达显着差异的基因进行聚类分析，并提取52个TET3介导的TNF诱导的基因，例如CXCL8和CXCL5、MYOCD、 CNN1，参与迁移参与迁移的基因，如 ITGB3；可进一步放大炎症的基因，如 LIF 和 IL1B；原癌基因，如 KIT 和 RELB；IFN 诱导基因，如 IFI44L、OAS1 和 RSAD2；以及 RA 风险 SNP，如 TNFAIP3 和除了这些基因之外，还发现了与神经系统相关的基因，例如NEFM、SCG2和NTRK3。这些研究表明 TNF-TET3 轴在调节 RA FLS 中血管翳组织重要基因的表达中发挥作用。我们目前正在研究与组蛋白修饰的关系。