自己免疫疾患の病変部位における自己抗体の産生機構の解明

阐明自身免疫性疾病病变部位自身抗体的产生机制

• 批准号: 22K08528
• 负责人: 竹下 勝
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08528/
• 关键词: 抗ARS抗体症候群; シェーグレン症候群; 自己抗体; 肺胞洗浄液; 唾液腺; 自己免疫疾患; B細胞

本研究は2疾患を対象にして自己抗体が出現する機構の解明を目指すものである。1つは抗Jo-1抗体、抗PL-7抗体などの別々の自己抗体が出現する一方、共通の筋/肺/皮膚症状を呈する抗ARS抗体症候群であり、もう1つは抗SSA抗体と抗セントロメア抗体という背景病態が異なる2系統の自己抗体が出現するシェーグレン症候群である。本年度の進捗は以下の通り。抗ARS抗体症候群においては、肺胞洗浄液検体6例と、偶然入手した唾液腺生検検体2例を収集し解析した。両者とも病変部位に浸潤した形質細胞をシングルセルソートし、各細胞の抗体の可変領域をシークエンスし、発現ベクターに組み込むことで、病変部位で作られていた抗体を実験室で再現した。計200種類以上の抗体を作製し、その反応性を調べ、抗Jo-1抗体、抗EJ抗体、抗Ro52抗体等の自己抗体が相当の割合で含まれている事を確認した。更にそれらの抗体のエピトープの解析、体細胞超変異数の解析を進め、論文化を進めている。また、少数例ながら筋生検検体の収集も進めている。シェーグレン症候群については、唾液腺生検検体を20例以上を収集し、組織を細切、コラゲナーゼ処理を行い、リンパ球と唾液腺上皮細胞をセルソートし、chromium controllerによるシングルセル解析を実施した。同疾患内で抗SSA抗体と抗セントロメア抗体という異なる自己抗体を持つ2群が存在することを考慮し、それぞれの抗体を持つ症例、両方を持つ症例、比較対象としての非シェーグレン症候群症例を一定数含めて収集した。引き続き解析を進めていく。

本研究旨在阐明自身抗体在两种疾病中出现的机制。一种是抗ARS抗体综合征，其中出现单独的自身抗体，例如抗Jo-1抗体和抗PL-7抗体，但存在常见的肌肉/肺部/皮肤症状，另一种是抗SSA抗体和其他抗体自身抗体。干燥综合征的特征是出现两种称为抗着丝粒抗体的自身抗体，它们具有不同的潜在病理学。今年的进展如下。关于抗ARS抗体综合征，我们收集并分析了6份肺泡灌洗液标本和2份偶然获得的唾液腺活检标本。在这两种情况下，通过对侵入病变部位的浆细胞进行单细胞分选，对每个细胞抗体的可变区进行测序，并将其整合到表达载体中，在实验室中复制了病变部位产生的抗体。总共产生了200多种抗体，并对其反应性进行了检查，确认其中含有相当比例的自身抗体，如抗Jo-1抗体、抗EJ抗体、抗Ro52抗体等。此外，我们正在对这些抗体的表位和体细胞超突变的数量进行分析，并在论文中发表这些结果。我们还在收集肌肉活检标本，尽管数量很少。针对干燥综合征，采集20余例唾液腺活检标本，将组织切成小片，用胶原酶处理，对淋巴细胞和唾液腺上皮细胞进行细胞分选，并使用铬控制器进行单细胞分析。考虑到同一疾病内存在两组不同的自身抗体，即抗SSA抗体和抗着丝粒抗体，我们收集了一定数量的具有每种抗体的病例、同时具有两种抗体的病例和非干燥综合征病例进行比较。包括。我们将继续分析。