Immunological analysis of the efficacy of SDF-1/CXCR4 inhibitors in idiopathic pulmonary fibrosis

SDF-1/CXCR4抑制剂治疗特发性肺纤维化疗效的免疫学分析

• 批准号: 22K08239
• 负责人: 安藤 航
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08239/
• 关键词: 特発性間質性肺炎; 薬学

2023年度は当初の研究計画を一部変更し、野生型マウス（C57BL/6系統）での薬剤投与実験より先立ち、ブレオマイシン誘発肺線維症モデルにおいて、ブレオマイシンの経気管投与によって主病変である肺の線維化像が観察できるかどうかを確認した。6から7週齢の雄性Lys-M Cre Cxcr4 flox/floxマウスおよびコントロールとしてCxcr4 flox/floxマウスを用いて、麻酔下にてブレオマイシン 2.5mg/kgを経気管投与し、day 0, 7, 14にて肺を摘出し、病理切片を作製した後、マッソントリクローム染色およびシリウスレッド染色にて、肺組織における線維化像を観察した。肺組織においてはコラーゲンの沈着および架橋形成はcKOマウスにおいてコントロールと比較して軽減している傾向がみられた。線維化の半定量解析は当該年度中に必要匹数を確保できなかったため、次年度に実施することとした。並行して、摘出した肺の一部をホモジナイズし、3-ヒドロキシプロリンの定量解析用サンプルおよび、mRNA抽出用のサンプルを得た。これらのサンプルも次年度に解析する予定である。本年度ではブレオマイシン誘発肺線維症モデルの検証を主に実施したが、ブレオマイシンの毒性が肺の線維化より強く現れていると疑われる個体が認められているため、投与量を1.5または2.0 mg/kgに変更するなどして、モデルの検証を引き続き実施し、系を確立する必要があると考えられた。

2023财年，我们对原来的研究计划进行了一些改变，在对野生型小鼠（C57BL/6品系）进行给药实验之前，我们对博来霉素诱导的主要病变肺部进行了气管内给药。确认是否可以观察到肺纤维化模型。使用6至7周龄的雄性Lys-M Cre Cxcr4 flox/flox小鼠和Cxcr4 flox/flox小鼠作为对照，在第0、7和14天在麻醉下通过气管给予2.5 mg/kg博来霉素。取肺并制备病理切片，采用Masson三色染色和天狼星红染色观察肺组织纤维化图像。在肺组织中，与对照组相比，cKO 小鼠的胶原沉积和交联形成趋于减少。纤维化的半定量分析无法确保当年所需的动物数量，因此决定明年进行。同时，将切除的肺的一部分均质化以获得用于3-羟脯氨酸定量分析的样品和用于mRNA提取的样品。这些样本也计划于明年进行分析。今年，我们主要验证了博来霉素诱导的肺纤维化模型，但由于怀疑某些个体表现出比肺纤维化更强烈的博来霉素毒性，因此我们决定将剂量增加至1.5或2.0 mg/kg，认为有必要继续下去。通过改变模型验证模型并建立系统