N-ミリストイル化を介したオートファジー制御機構の解明と新しい心不全治療法の開発

阐明N-肉豆蔻酰化介导的自噬控制机制并开发新的心力衰竭治疗方法

• 批准号: 22K08161
• 负责人: 冨田 湧介
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08161/
• 关键词: 心不全; N-ミリストイル化; 蛋白翻訳後修飾; オートファジー; GLIPR2

心不全の病態において不良なタンパク質の蓄積が関与しており、心不全の発症進展を防ぐために心筋細胞内の恒常性維持機構が備わっている。オートファジーは、タンパク質の品質管理機構の重要な仕組みであるため、オートファジーの異常は心不全を含めて様々な疾患と関連する。タンパク質のN-ミリストイル化は重要な翻訳後修飾であるが、心筋細胞におけるミリストイル化基質タンパクの網羅的解析により、オートファジーに関連するタンパク質GLIPR2をその候補分子の一つとして同定した。本研究はオートファジーにおけるGLIPR2ミリストイル化の意義を解明し、心臓における役割を明らかにすることを目的とする。当該年度は、N-ミリストイル化GLIPR2のオートファジーにおける役割の検討を行なった。N-ミリストイル化を受けない変異型GLIPR2の意義を評価するため、N末端2番目のグリシンをアラニンに変異させたG2A変異型、N末端3番目のリジンをアルギニンに変異させたK3R変異型、その両方を持つG2A/K3R変異型GLIPR2のコンストラクトを作成した。このコンストラクトをH9c2細胞に導入し、細胞内局在、オートファジー関連分子、生存率を評価した。オートファジー促進/抑制状態やAngiotensin IIなどの病的状態での意義も検討している。

缺陷蛋白的积累与心力衰竭的病理有关，心肌细胞内的稳态机制可以预防心力衰竭的发生和进展。自噬是蛋白质质量控​​制的重要机制，自噬异常与包括心力衰竭在内的多种疾病有关。蛋白质的N-肉豆蔻酰化是一种重要的翻译后修饰，通过对心肌细胞中肉豆蔻酰化底物蛋白的综合分析，我们确定自噬相关蛋白GLIPR2为其候选分子之一。本研究的目的是阐明GLIPR2肉豆蔻酰化在自噬中的意义并阐明其在心脏中的作用。今年，我们研究了 N-肉豆蔻酰化 GLIPR2 在自噬中的作用。为了评估不进行N-肉豆蔻酰化的突变体GLIPR2的意义，我们研究了N端第二个甘氨酸突变为丙氨酸的G2A突变体、N端第三个赖氨酸突变为精氨酸的K3R突变体，并且我们创建了具有两者的 G2A/K3R 突变体 GLIPR2 的构建体。将该构建体导入H9c2细胞，并评估细胞内定位、自噬相关分子和存活率。这在自噬促进/抑制状态和血管紧张素 II 等病理条件下的重要性也在研究中。

项目成果

Cardiomyocyte N-myristoylation plays an essential role during the development of heart failure

心肌细胞 N-肉豆蔻酰化在心力衰竭的发生过程中发挥重要作用

• 发表时间: 2022
• 作者: Yusuke Tomita; Tomofumi Misaka; Fumiya Anzai; Shohei Ichimura; Kento Wada; Yusuke Kimishima; Yasuchika Takeishi
• 通讯作者: Yasuchika Takeishi

Decreases in hepatokine Fetuin-A levels are associated with hepatic hypoperfusion and predict cardiac outcomes in patients with heart failure. (In press)

肝因子胎球蛋白-A 水平的降低与肝脏灌注不足相关，可预测心力衰竭患者的心脏结局。

• DOI: 10.1007/s00392-022-02023-0
• 发表时间: 2022
• 影响因子: 5
• 作者: Tomita Yusuke;Misaka Tomofumi;Yoshihisa Akiomi;Ichijo Yasuhiro;Ishibashi Shinji;Matsuda Mitsuko;Yamadera Yukio;Ohara Himika;Sugawara Yukiko;Hotsuki Yu;Watanabe Koichiro;Anzai Fumiya;Sato Yu;Sato Takamasa;Oikawa Masayoshi;Kobayashi Atsushi;Takeishi Yasuchi
• 通讯作者: Takeishi Yasuchi