NMDA受容体シグナル抑制と温熱療法併用放射線治療での膵臓癌の克服

放疗联合NMDA受体信号抑制和热疗攻克胰腺癌

• 批准号: 22K07711
• 负责人: 飯泉 天志
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07711/
• 关键词: NMDA受容体; 放射線治療; 温熱療法; 増感作用; 膵臓癌

1.　毒性評価試験と細胞死実験：これまでに線維芽細胞L929に対してN-methyl-D-aspartate（NMDA）受容体拮抗薬であるDizocilpine maleate (MK-801)およびメマンチンを段階的に濃度変化させてMTTアッセイを用いてIC50を測定する毒性評価試験と対象とする細胞としてヒト膵臓癌細胞であるBxPC3を用いてNMDA受容体拮抗薬の抗腫瘍増感効果を調査する準備を進めてきている。しかしながら、参加した学会での情報収集や分担研究者との打ち合わせの中で、対象細胞にNMDA受容体が確かに発現していることの証左をつかむために、Revevrse transcription polymerase chain reaction（RT-PCR）によるRNAの存在確認を一連の研究過程の中で実施する必要性が明らかとなった。従って、今後毒性評価試験および抗腫瘍増感効果調査と併行して、RT-PCRによる解析も分担研究者の協力を得ながら実施していく予定である。2.　NMDA受容体拮抗薬の細胞周期停止機構への影響：上記1.の実験の次の段階として予定しているNMDA受容体拮抗薬使用下での温熱併用放射線の細胞周期停止機構への影響を明らかにするための準備を進めてきている。分担研究者と実験実施についてさらに協議を進め、本年度には本実験も実施していく予定である。3.　3次元（3D）培養腫瘍モデルへの効果を検証する：上記2.で得られた最も抗腫瘍効果の高い組み合わせを用いて、3D細胞でNMDA受容体拮抗薬存在下での温熱併用放射線に対する増感効果を細胞抑制効果をみることで検証する。本実験は今後のトランスレーショナル研究への架け橋となる研究であり、学会参加を通じて実験手法やトランスレーショナル研究への移行の仕方等について情報収集に努めた。

1.毒性评价试验和细胞死亡实验：到目前为止，我们使用了N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体拮抗剂马来酸地佐西平针对成纤维细胞L929细胞。 (MK-801) 和美金刚逐步浓度以使用 MTT 测定测量 IC50 的准备工作正在进行中，以研究肿瘤致敏作用。然而，在我参加的会议以及与我的合作研究人员的会议上收集信息的过程中，我决定使用Revrse转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法来获取NMDA受体确实在靶标中表达的证据细胞）已经清楚，作为一系列研究过程的一部分，有必要确认 RNA 的存在。因此，在毒性评价试验和抗肿瘤增敏作用研究的同时，我们计划与我们的共同研究人员合作进行RT-PCR分析。 2. NMDA受体拮抗剂对细胞周期阻滞机制的影响：放射线联合热疗在NMDA受体拮抗剂的使用下对细胞周期阻滞机制的影响，计划作为上述1.中实验的下一步准备工作正在进行中。来揭示这一点。我们将继续与我们的共同研究人员讨论实验的实施，并计划在本财年进行这项实验。 3.验证对三维（3D）培养肿瘤模型的效果：使用上述2.中获得的具有最高抗肿瘤效果的组合，在3D细胞中存在NMDA受体拮抗剂的情况下给予放射结合热疗致敏。通过观察细胞抑制效果来验证对细胞的作用。这个实验是未来转化研究的桥梁，通过参加学术会议，我们努力收集有关实验方法以及如何过渡到转化研究的信息。