一次包虫病巣モデルおよび活性化六鉤幼虫を利用したエキノコックス治療法と予防薬開発

利用原发性包虫病变模型和活化六角形幼虫的棘球绦虫治疗方法和预防药物开发

基本信息

批准号：
22K07048
负责人：
孝口裕一
金额：
$ 2.41万
依托单位：
Hokkaido Institute of Public Health
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

エキノコックス（包虫）症は、感染した場合放置すれば死に至り、安全で有効な薬剤が無い。本邦においても年間20～30人の新規患者が報告され、新たな薬剤等の治療方法が生み出されないこは、流行地域の人々に健康上の脅威を与えているという明確な事実が存在する。本課題では投薬時の本寄生虫の生存戦略の理解とヒトの治療を解決すべき最優先の問題と定め、①糖鎖分解酵素により病巣のクチクラ層を脆弱化し、薬剤吸収や宿主免疫による受傷性を向上させる治療法開発、②エキノコックスのエネルギー産生を司る、好気的・嫌気的呼吸鎖両方を阻害する薬剤候補を組み合わせた、安全で効果的なヒトの治療薬開発、③活性化させた六鉤幼虫を用いた培養系による予防薬開発を行うことを目的とした。2022年（R4年）度、①当該寄生虫の中間宿主における病巣を作成した。マウスに虫卵を投与し、感染後7~16週までのシストを摘出、病理切片を作成・クチクラ層を観察した。また、摘出病巣に対して、クチクラ層を構成する糖鎖切断酵素を作用させた。その結果、クチクラ層に変化は見られなかった。そこで、摘出病巣の実組織を取り除くために、コラゲナーゼを、糖鎖構造破壊のために、コンドロイチナーゼを作用させた。前者の処理では実組織を溶解し、クチクラ層が露出する状態となり、後者の処理によりクチクラ層は僅かに脆弱化したように観察された。引き続き、クチクラ層の酵素学的処理による脆弱化を試みる。②について、我々が見出した抗エキノコックス薬候補である、アトバコンに加え、メフロキンおよび3-ブロモピルビン酸を併用し、当該寄生虫にin vitroで作用させた。その結果、嫌気条件下でアトバコンのみでは殺滅させられなかった当該寄生虫の原頭節を、完全に殺滅させることに成功した。③について、虫卵の活性化効率を上げるため、げっ歯類の胆汁を採集中である。

如果不及时治疗，棘球绦虫（包虫病）可能会导致死亡，并且没有安全有效的药物。在日本，每年报告20至30名新患者，缺乏新药和其他治疗方法对流行地区人民的健康构成威胁是显而易见的事实。在这个项目中，我们设定了要解决的首要问题，以了解这种寄生虫在人类用药和治疗过程中的生存策略，开发改善性能力的治疗方法，② Echino。通过结合抑制控制 Cox 能量产生的需氧和厌氧呼吸链的候选药物来开发安全有效的人类疗法； ③ 使用活化的六角形幼虫的培养系统，目的是开发预防药物。 2022年（R4年），①在寄生虫的中间宿主中产生病变。将虫卵给予小鼠，感染后7～16周取出包囊，制作病理切片，观察角质层。此外，使构成角质层的糖链裂解酶作用于切除的病变处。结果，在角质层中没有观察到变化。因此，用胶原酶去除切除病灶的真实组织，用软骨素酶破坏糖链结构。在前一种治疗中，真实组织被溶解，角质层暴露出来，而在后一种治疗中，角质层似乎略有减弱。接下来，我们将尝试通过酶处理来弱化角质层。关于②，我们将甲氟喹和3-溴丙酮酸与我们发现的抗棘球蚴候选药物阿托伐醌联合使用，并使其在体外作用于寄生虫。结果，我们成功地彻底杀死了在厌氧条件下单独使用阿托伐醌无法杀死的寄生虫原基。关于③，我们目前正在收集啮齿类动物的胆汁，以提高激活虫卵的效率。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

コンジェニックマウスを用いた多胞条虫の原頭節形成における宿主側遺伝子の探索

使用同源小鼠寻找多泡绦虫原节形成的宿主基因

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
佐藤佳祐;粉川萌;彦坂周栄;孝口裕一;日高正人;松山紘之;森松正美;安居院高志
通讯作者：
安居院高志

マウス2系統における多包条虫Echinococcus multilocularis感染初期動態の比較

两种小鼠品系多房棘球绦虫感染的初始动力学比较

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
林直樹;孝口裕一;今里裕平;入江隆夫;八木欣平;野中成晃;中尾亮
通讯作者：
中尾亮

近年北海道内で確認されたタヌキの多包条虫感染例について

北海道近年来确诊貉感染绦虫病例

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
日高正人;松山紘之;浦口宏二;孝口裕一
通讯作者：
孝口裕一

共培養細胞種による多包条虫原頭節の発育比較と長期培養による成虫化

共培养细胞类型绦虫原生动物发育与长期培养成虫的比较

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
長澤靖葉;林直樹;孝口裕一;八木欣平;中尾亮;野中成晃
通讯作者：
野中成晃

Killing Two Birds with One Stone: Discovery of Dual Inhibitors of Oxygen and Fumarate Respiration in Zoonotic Parasite, Echinococcus multilocularis

一石二鸟：人畜共患寄生虫多房棘球绦虫中氧和富马酸呼吸双重抑制剂的发现

DOI：
10.1128/aac.01428-22
发表时间：
2023-03-16
期刊：
影响因子：
4.9
作者：
Enkai Shigehiro;Kouguchi Hirokazu;Inaoka Daniel Ken;Shiba Tomoo;Hidaka Masahito;Matsuyama Hiroyuki;Sakura Takaya;Yagi Kinpei;Kita Kiyoshi
通讯作者：
Kita Kiyoshi