筋ジストロフィーに対する機能強化羊膜間葉系幹細胞を用いた抗炎症療法と評価系の構築

增强功能羊膜间充质干细胞治疗肌营养不良症的抗炎治疗及评估系统

基本信息

批准号：
22K06921
负责人：
笠原優子
金额：
$ 2.66万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06921/
关键词：
間葉系幹細胞筋ジストロフィー炎症制御羊膜細胞治療

项目摘要

最も重篤な筋疾患であるデュシェンヌ型筋ジストロフィー（DMD）は、ジストロフィン欠損に加え慢性炎症により病態進行が促されるため、ジストロフィン発現回復による根本治療が求められる一方で、新たな抗炎症療法の開発が望まれる。従来のステロイド療法は、効果の個人差や長期服用による副作用が懸念されるため、慢性炎症を標的にした新たな治療法として、間葉系幹細胞（MSC）を用いた細胞治療に着目した。MSCは炎症への集積性と制御作用を示すことから、細胞性医薬品として複数の炎症性疾患への適応拡大が進められており、申請者らはMSCを全身反復投与したDMDモデル動物において、病態緩和、炎症の鎮静化、運動機能の維持効果を報告している。しかし、十分な治療効果を得るためには高用量のMSCが必要であり、また、骨格筋組織に取り込まれたMSCによる炎症制御とその生理的意義は十分に解明されていない。さらに、社会実装を目指すにおいてはDMDの重症度や治療効果の指標となる有用なマーカー開発が必須であると考えられる。そこで本課題では、羊膜由来MSC (AMSC)を用いたDMDに対する新規抗炎症療法の基盤技術の検証を目的とする。先ずは、遺伝子導入により機能強化したAMSCを作出、DMD骨格筋細胞への作用機序の検討を行い、さらに、重篤な筋萎縮状態でも測定可能な新たなバイオマーカーを獲得し、治療の指標となる候補物質を検討する計画である。今年度は、AMSCによる骨格筋特異的な組織保護効果や炎症制御能を増強するため、遺伝子導入により分泌因子を増強したAMSCの検討を行った。また、疾患特異的な筋管形成におけるin vitro評価系を構築するため、DMDマウスの骨格筋細胞を採取・培養条件を確立したのち、AMSCとの共培養において液性因子の発現変動による筋細胞への相互作用を検討した。

在最严重的肌肉疾病杜兴氏肌营养不良症（DMD）中，除了肌营养不良蛋白缺乏之外，慢性炎症也会加速疾病进展，因此需要通过恢复肌营养不良蛋白表达进行基本治疗，同时正在开发新的抗炎治疗方法。由于传统类固醇疗法担心长期使用的效果和副作用存在个体差异，因此我们重点关注使用间充质干细胞（MSC）的细胞疗法，作为针对慢性炎症的新治疗方法。由于间充质干细胞表现出对炎症的积累和控制作用，因此它们作为细胞介导药物的用途正在扩大到治疗多种炎症性疾病，据报道可有效缓解、镇静炎症和维持运动功能。然而，需要高剂量的MSC才能获得足够的治疗效果，并且MSC掺入骨骼肌组织对炎症的控制及其生理意义尚未完全阐明。此外，为了实现社会实施，开发有用的标记物作为 DMD 严重程度和治疗效果的指标被认为是至关重要的。因此，本项目的目的是验证利用羊膜间充质干细胞（AMSCs）治疗DMD的新型抗炎疗法的基础技术。首先，我们将通过基因转移创建功能增强的AMSC，检查DMD骨骼肌细胞的作用机制，并获得即使在严重肌肉萎缩情况下也可以测量的新生物标志物，以提供治疗指标。该计划是研究候选物质。将要今年，为了增强AMSCs的骨骼肌特异性组织保护作用和炎症控制能力，我们研究了通过基因转移增强分泌因子的AMSCs。此外，为了构建疾病特异性肌管形成的体外评估系统，我们收集了 DMD 小鼠的骨骼肌细胞并建立了培养条件。