「有害」アレキサンドリウムの魚毒化合物の特定

“有害”亚历山大鱼有毒化合物的鉴定

基本信息

  • 批准号:
    22K05840
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.75万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2022
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2022-04-01 至 2025-03-31
  • 项目状态:
    未结题

项目摘要

有害赤潮原因プランクトンAlexandrium leeiの魚毒成分を特定するために、令和4年度は、液液分配や固相抽出による毒成分の化学的な極性の把握と適切な分画精製法の検討を行った。A. leeiの凍結融解液を水とジエチルエーテル、次に乾固したジエチルエーテル画分を、メタノールとヘキサンで液-液分配した。各画分の有機溶媒を除去し、ヒメダカに暴露した結果、水層に凍結融解液と同等の毒性が確認され、ジエチルエーテル層およびヘキサン層、メタノール層に毒性は確認されなかった。次に、A. leeiの凍結融解液を疎水性物質を吸着する合成吸着樹脂に通して含水メタノールで分画した。試料を乾固した後、滅菌海水に希釈した分画液をヒメダカおよびブリ稚魚に暴露し、有毒画分を確認した。次に合成吸着樹脂の有毒画分をオクタデシルシリル化(ODS)シリカゲル担体に通して含水メタノールで分画し乾固した後、滅菌海水へ希釈した試料をヒメダカへ暴露した結果、一部の分画液でヒメダカへの強い毒性を確認した。以上により、A. leeiの有する魚毒成分を液液分配やクロマトグラフィーで分画精製できることを確認し、適切な担体を選定することができた。また、ヒメダカだけでなくブリでも同様の分画液でへい死が確認されたことから、養殖対象魚に対する魚毒成分を検出できていると考えられる。さらに、液液分配およびクロマトグラフィーによる分画の結果からA. leeiの魚毒成分は両親媒性の化合物である可能性が示唆された。
为了鉴定引起有害赤潮的浮游生物雷氏亚历山大藻中的鱼类有毒成分,2020财年,我们通过液液分配和固相萃取研究了有毒成分的化学极性,并研究了适当的分馏和纯化方法。塔。将A.leii的冻融溶液用水和二乙醚进行液-液分配,然后将干燥的二乙醚级分与甲醇和己烷混合。除去各级分的有机溶剂,将其暴露于青鳉中,结果在水层中确认到与冻融溶液同等的毒性,在二乙醚层、己烷层中确认没有毒性。和甲醇层。接下来,将冷冻和解冻的 A. leei 溶液通过吸附疏水性物质的合成吸附树脂,并用甲醇水溶液分级。样品干燥后,用无菌海水稀释该级分,并暴露于幼年青鳉和鰤鱼,确认有毒级分的存在。接下来,将合成吸附树脂的有毒级分通过十八烷基甲硅烷基化(ODS)硅胶载体,用甲醇水溶液分级并干燥。将样品用无菌海水稀释并暴露于日本青鳉液中。对日本青鳉有剧毒。通过以上研究,我们证实了李氏鱼毒素成分可以通过液液分配和色谱法进行分离纯化,并能够选择合适的载体。另外,由于使用相同的分馏溶液,不仅在日本青鳉中而且在日本鰤鱼中都确认了死亡,因此认为可以检测到对养殖对象鱼的鱼毒成分。此外,液-液分配和色谱分离结果表明,A. leii 的鱼毒成分可能是两亲性化合物。

项目成果

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