膵癌微小環境の多様性による標的転移臓器決定機序の解明とその制御

阐明胰腺癌微环境多样性的靶转移器官决定机制及其控制

• 批准号: 16J03962
• 负责人: 阿部 俊也
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-22 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J03962/
• 关键词: 膵癌; 癌間質相互作用; 腹膜播種; 肝転移; 線維芽細胞; 微小環境; 腹膜中皮細動; 膵星細胞

本年度、膵癌原発巣と転移巣において、膵癌細胞と間質との相互作用のメカニズムをさらに明らかにするため、まず切除したヒト腹膜播種組織、肝転移組織より転移巣由来の繊維芽細胞の樹立を行った。膵癌細胞とこれらの細胞で間接共培養を行い、in vitroで膵癌細胞は膵周囲の間質の主成分である膵星細胞と比べて膵癌腹膜播種由来繊維芽細胞、膵癌肝転移巣由来維芽細胞との共培養において遊走能、浸潤能が亢進することを示した。さらに、樹立した膵星細胞と腹膜播種由来繊維芽細胞を用いてマイクロアレイ解析を行い、CACNA1Hという遺伝子が原発巣の膵星細胞と比べて腹膜播種由来繊維芽細胞で低発現していることを確認した。またTCGAの膵癌予後データベースを用いて、CACNA1H低発現群が高発現群と比較して有意に予後不良であることを確認した。本年度、これまでの研究成果により第11回日本膵臓学会国際優秀演題賞を受賞という評価を得た。その他の成果として、腹膜播種形成のメカニズムに関して、in vitroで膵癌細胞が腹膜中皮細胞をclearanceするように浸潤する現象(mesothelial clearance)を明らかにした。さらにインテグリン結合タンパクであるTalin1に着目し、まず膵癌切除症例において免疫組織科学染色を行い、膵癌組織においてTalin1が発現していることを確認した。またmRNA、タンパクレベルにおいてもTalin1が膵癌細胞で発現していることを確認した。続いて、機能的実験として、SiRNAを用いて膵癌細胞でのTalin1抑制実験を行い、膵癌細胞の遊走能、浸潤能、増殖能がSiRNA群で有意に低下することを示した。さらに、Talin1を抑制することにより、mesothelial clearanceが低下することを明らかにした。

今年，为了进一步阐明原发性和转移性胰腺癌肿瘤中胰腺癌细胞与间质相互作用的机制，我们首先从切除的人腹膜播散组织和肝转移组织中建立了转移性肿瘤来源的成纤维细胞。在体外将这些细胞与胰腺癌细胞进行间接共培养，发现胰腺癌细胞中源自胰腺癌腹膜播散的成纤维细胞和源自胰腺癌肝转移的成纤维细胞浓度高于胰腺星状细胞，胰腺周围基质的主要成分，与细胞共培养后，其迁移和侵袭能力得到增强。此外，我们使用建立的胰腺星状细胞和腹膜播散来源的成纤维细胞进行了微阵列分析，并确认了CACNA1H基因在腹膜播散来源的成纤维细胞中的表达水平低于原代胰腺星状细胞的表达水平。此外，利用TCGA胰腺癌预后数据库，我们证实CACNA1H低表达组的预后显着差于高表达组。今年，我们凭借迄今为止的研究成果获得了日本胰腺学会第 11 届国际杰出演讲奖。另外，关于腹膜播散形成的机制，我们在体外揭示了胰腺癌细胞浸润腹膜间皮细胞（间皮间隙）的现象。此外，我们关注整合素结合蛋白Talin1，首先对胰腺癌切除病例进行免疫组化染色，证实Talin1在胰腺癌组织中表达。我们还证实Talin1在胰腺癌细胞中在mRNA和蛋白质水平上表达。接下来，作为功能实验，我们利用SiRNA对胰腺癌细胞进行了Talin1抑制实验，结果表明SiRNA组胰腺癌细胞的迁移、侵袭和增殖能力显着降低。此外，我们发现抑制 Talin1 可以降低间皮清除率。

项目成果

膵癌切除症例における術中腹腔洗浄細胞診の意義

术中腹腔灌洗细胞学检查在胰腺癌切除病例中的意义

• 发表时间: 2016
• 作者: 阿部俊也;大内田研宙;森泰寿;仲田興平;宮坂義浩;大塚隆生;植木隆;永井英司;小田義直;中村雅史
• 通讯作者: 中村雅史

Extra-pancreatic invasion induces lipolytic and fibrotic changes in the adipose microenvironment, with released fatty acids enhancing the invasiveness of pancreatic cancer cells.

胰腺外侵袭会引起脂肪微环境的脂解和纤维化变化，释放的脂肪酸会增强胰腺癌细胞的侵袭力。

• DOI: 10.18632/oncotarget.15430
• 发表时间: 2017
• 作者: Okumura T; Ohuchida K; Sada M; Abe T; Endo S; Koikawa K; Iwamoto C; Miura D; Mizuuchi Y; Moriyama T; Nakata K; Miyasaka Y; Manabe T; Ohtsuka T; Nagai E; Mizumoto K; Oda Y; Hashizume M; Nakamura M.
• 通讯作者: Nakamura M.

Talin1 promotes tumor invasion in pancreatic cancer.

Talin1 促进胰腺癌的肿瘤侵袭。

• 发表时间: 2016
• 作者: Abe T; Ohuchida K; Endo S; Koikawa K; Okumura T; Sada M; Moriyama T; Nakata K; Miyasaka Y; Manabe T; Ohtsuka T; Nagai E; Mizumoto K; Nakamura M
• 通讯作者: Nakamura M

Degree of desmoplasia in metastatic lymph node lesions is associated with lesion size and poor prognosis in pancreatic cancer patients

胰腺癌患者转移性淋巴结病灶的结缔组织增生程度与病灶大小和不良预后相关

• DOI: 10.3892/ol.2017.6549
• 发表时间: 2017
• 影响因子: 2.9
• 作者: Nakayama H; Ohuchida K; Yoshida M; Miyazaki T; Takesue S; Abe T; Endo S; Koikawa K; Okumura T; Moriyama T; Nakata K; Miyasaka Y; Shirahane K; Manabe T; Ohtsuka T; Toma H; Tominaga Y; Nagai E; Mizumoto K; Oda Y; Nakamura M.
• 通讯作者: Nakamura M.

Comparison of the prognostic value of preoperative factors in patients with pancreatic cancer.

术前因素对胰腺癌患者预后价值的比较

• 发表时间: 2017
• 作者: Abe K; Nakata K; Mori Y; Miyasaka Y; Ohuchida K; Ohtsuka T; Nakamura M
• 通讯作者: Nakamura M