白紋羽病菌のヴァイロコントロールに向けた新規２分節ｄｓＲＮＡの性状解析

用于白斑真菌病毒控制的新型双片段 dsRNA 的表征

• 批准号: 13F03083
• 负责人: 鈴木 信弘
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13F03083/
• 关键词: ヴァイロコントロール; マイコウイルス; dsRNA; メガビルナウイルス; 白紋羽病菌; IRES; 菌類ウイルス; 生物防除; ヴァイロコンロール

白紋羽菌、Rosellinia necatrixは日本の果樹に重大な被害を齎している植物糸状菌病である。本研究では、白紋羽菌に感染し、その病原力を衰退させる新規ウイルス(Rosellinia necatrix megabirnavirus 1, RnMBV1)のウイルス学的性状とヴァイロコントロール（生物防除）因子としての潜在力を調べ、マイコウイルス学、ヴァイロコントールへの貢献を目指し、以下の成果を記述する。1-1ウイルス粒子トランスフェクション法を利用し、菌細胞質不和合性の複数の白紋羽病菌への感染性ならびに病原力低下効果を確認した。1-2 RnMBV1を目が異なるクリ胴枯病菌への感染性ならびに病原力低下効果を確認した。RnMBV1のヴァイロコントロール因子としての可能性を広げる成果である(JAMAL氏が来日する以前に前倒しで実施し、論文掲載にこぎ着けた)。1-3ヴァイロコントロール因子の長期安定保存が不可欠であるが、精製RnMBV1粒子は -80Cで１年以上安定に感染性を保持していた。 　　　　　　　2-1 RnMBV1ゲノムセグメントはそれぞれ極めて長い(約1.6 kb)の非翻訳領域（ミニシストロンを複数含む）と２つのORFをもつ。5’側ORFがどのような機構で完全長mRNAから翻訳されるかを、リポーター系を確立した。2-2 5’非翻訳領域がIRES（内部リボゾームエントリー部位）活性を持つことを確認し、さらにそのコア活性領域をORF1領域近傍の５００塩基の絞り込みに成功した。2-3感染性RnMBV1核酸の合成を試みたが、成功には至らなかった。

Roselinia necatrix是一种对日本果树造成严重损害的植物真菌病害。在这项研究中，我们研究了一种感染并降低其致病性的新型病毒（Rosellinia necatrix megabirnavirus 1，RnMBV1）的病毒学特性及其作为病毒控制因子的潜力，为了促进病毒学和病毒控制，我们描述了以下结果。利用1-1病毒颗粒转染方法，我们证实了对多种细胞质不相容的白斑细菌的感染性和毒力降低作用。 1-2 我们确认了RnMBV1对不同目的板栗枯萎病真菌的感染性及其毒力降低作用。这是一项扩大了RnMBV1作为病毒控制因子的潜力的成果（这项工作是在JAMAL来日本之前提前进行的，我们能够发表论文）。 1-3种病毒控制因子的长期稳定储存至关重要，纯化的RnMBV1颗粒在-80℃下可稳定保持感染性1年以上。 2-1 每个RnMBV1基因组片段都有一个极长（约1.6 kb）的非翻译区（包括多个小顺反子）和两个ORF。我们建立了一个报告系统来确定从全长 mRNA 翻译 5' ORF 的机制。 2-2 我们确认5'非翻译区具有IRES（内部核糖体进入位点）活性，并进一步将核心活性区域缩小到ORF1区域附近的500个碱基。 2-3 我们尝试合成感染性RnMBV1核酸，但没有成功。

项目成果

白紋羽病菌の潜在的ヴァイロコントロール因子がクリ胴枯病菌でも効果あり。

白冠真菌的潜在病毒控制因子也能有效对抗板栗枯萎病真菌。