酵母Ｙａｒｒｏｗｉａ　ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａのｎ－アルカン代謝と制御に関する研究

解脂耶氏酵母正构烷烃代谢及调控研究

• 批准号: 13J07284
• 负责人: 岩間 亮
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J07284/
• 关键词: Yarrowia lipolytica; n-アルカン代謝; オキシステロール結合タンパク質ホモログ; 細胞膜-小胞体コンタクトサイト; シトクロムP450; 長鎖アルコールデヒドロゲナーゼ; 長鎖アルコールオキシダーゼ; アルデヒドデヒドロゲナーゼ

これまでの本研究で、n-アルカン資化性酵母Yarrowia lipolyticaにおけるn-アルカン代謝経路中の代謝変換酵素を明らかにしてきた。本年度はn-アルカン資化に関与する代謝変換酵素以外をコードする遺伝子を探索し、それらの解析を試みた。1. Y. lipolyticaのn-アルカン代謝における細胞膜-小胞体コンタクトサイトの役割Y. lipolyticaにおいて、小胞体膜タンパク質をコードすると推定されるSCS2の破壊株では、n-アルカン資化能が低下するが、その理由は不明であった。S. cerevisiaeにおいて、SCS2、SCS22、TCB1、TCB2、TCB3、IST2が小胞体と細胞膜とのコンタクトサイト形成に関わることが示唆されていた。そこで、Y. lipolyticaにおけるこれらのオルソログをSCS2、SCS22、TCB1、TCB2、IST2と命名し解析した。SCS2、SCS22、TCB1、TCB2の4重破壊株はn-アルカンを炭素源とした培地で生育がより悪化したことから、n-アルカン資化に細胞膜-小胞体のコンタクトサイトが関与する可能性が考えられた。2. Y. lipolyticaのオキシステロール結合タンパク質ホモログのn-アルカン代謝における役割S. cerevisiaeにおいてオキシステロール結合タンパク質ホモログをコードするOSH3のY. lipolyticaにおけるオルソログ(OSH3と命名)の破壊株では、n-アルカン資化能が低下した。Y. lipolyticaのゲノムには、オキシステロール結合タンパク質と相同性を示すタンパク質をコードする遺伝子がさらに３つ見出され、これらをそれぞれOSH1、OSH4、OSH6と命名した。これらについて破壊株を作製し、解析したところ、OSH6破壊株においてもn-アルカン資化能が低下した。OSH3破壊株ではn-アルカンにより誘導されるP450由来のピークが野生型株と同程度に見られたのに対して、OSH6破壊株ではP450由来のピークが低下していた。この結果から、OSH6破壊株では機能的なP450が生産できないために、n-アルカン資化能が低下していることが示唆された。

这项研究揭示了N-烷烃辅助酵母Yarrowia脂溶剂中N-烷烃代谢途径中的代谢转化酶。今年，我们搜索了涉及N-烷烃同化的代谢转化酶以外的其他编码基因，并试图分析它们。 1. Role of plasma membrane-endoplasmic reticulum contact sites in the n-alkane metabolism of Y. lipolytica In Y. lipolytica, the ability to assign n-alkane to Y. lipolytica is reduced in the disruption strain of SCS2, which is presumed to encode endoplasmic reticulum membrane proteins, but the reason for this is unknown.有人提出，SCS2，SCS22，TCB1，TCB2，TCB3和IST2参与了酿酒酵母中内质网和细胞膜之间的接触部位的形成。因此，Y. lipolytica中的这些直系同源物命名为SCS2，SCS22，TCB1，TCB2和IST2并分析。由于SCS2，SCS22，TCB1和TCB2的四倍破坏性菌株的生长在N-Alkane作为碳源作为碳源的培养基恶化，因此被认为可能参与N-AlkAteAltAkeAne的细胞膜 - 肾上腺质网接触位点。 2。脂溶质脂溶质的氧蛋白酶结合蛋白同源物在N-烷烃代谢中的作用在OSH3的直系同源物（命名为OSH3）的破坏菌株中，该菌株编码氧蛋白酶结合的蛋白质同源性在S. cerevisiae，N-Alkane Asset能力降低。在Y. lipolytica基因组中发现了另外三个基因，该基因组编码与氧蛋白酶结合蛋白同源的蛋白质，分别命名为OSH1，OSH4和OSH6。当制备这些菌株并分析这些菌株时，在OSH6破坏性菌株中，N-Alkane资产能力也降低了。在OSH3脱离的菌株中，从N-烷烃诱导的P450衍生的峰值与野生型菌株相同的水平，而在Osh6 disted菌株中，降低了从P450衍生的峰。这些结果表明，由于OSH6破坏菌株无法产生功能性P450，N-Alkane资产能力降低了。

项目成果

油脂生産酵母Yarrowia lipolyticaの長鎖アルコール資化に関わるアルコールデヒドロゲナーゼおよび長鎖アルコールオキシダーゼ遺伝子の同定と解析

产油酵母解脂耶氏酵母中参与长链醇同化的乙醇脱氢酶和长链醇氧化酶基因的鉴定和分析

• 发表时间: 2015
• 作者: 岩間亮;太田明徳;堀内裕之;福田良一
• 通讯作者: 福田良一

Involvement of acyl-CoA synthetase genes in n-alkane assimilation and fatty acid utilization in yeast Yarrowia lipolytica

解脂耶氏酵母中酰基辅酶A合成酶基因参与正烷烃同化和脂肪酸利用

• DOI: 10.1093/femsyr/fov031
• 发表时间: 2015
• 期刊: FEMS Yeast Research
• 影响因子: 3.2
• 作者: Tenagy;Jun Seok Park;Ryo Iwama;Satoshi Kobayashi;Akinori Ohta;Hiroyuki Horiuchi;Ryouichi Fukuda
• 通讯作者: Ryouichi Fukuda

Functional analysis of twelve cytochromes P450 subfamily 52 in n-alkane assimilating yeast Yarrowia lipolytica

正烷烃同化酵母解脂耶氏酵母12种细胞色素P450亚家族52的功能分析

• 发表时间: 2014
• 作者: Ryo Iwama;Hiroshi Takai;Satoshi Kobayashi;Akinori Ohta;Hiroyuki Horiuchi;Ryouichi Fukuda.
• 通讯作者: Ryouichi Fukuda.

Yeast2013の参加報告とoleaginous酵母Yarrowia lipolytica研究の現状

Yeast2013 产油酵母解脂耶氏酵母参展报告及研究现状

• 发表时间: 2013
• 作者: Ryo Iwama;Hiroshi Takai;Satoshi Kobayashi;Akinori Ohta;Hiroyuki Horiuchi;Ryouichi Fukuda.;岩間 亮;岩間 亮;岩間 亮
• 通讯作者: 岩間 亮

酵母Yarrowia lipolyticaが有する12種のCYP52ファミリータンパク質の機能解析

解脂耶氏酵母12种CYP52家族蛋白的功能分析

• 发表时间: 2014
• 作者: 岩間亮;高井寛;小林哲;堀内裕之;太田明徳;福田良一
• 通讯作者: 福田良一