FGF-1受容体に存在するヘパラン硫酸鎖のシグナル伝達における役割

FGF-1 受体中硫酸乙酰肝素链在信号转导中的作用

基本信息

批准号：
10134208
负责人：
柳下正樹
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10134208/
关键词：
ヘパラン硫酸プロテオグライカン FGF シグナル伝達副甲状腺 FGF受容体

项目摘要

これまでの研究でPTr細胞株の細胞増殖は細胞外液中カルシウム濃度に依存しており、おもにFGF-1のautocrine制御により調節されていることが明らかにされた。このFGF-1の作用機序において細胞表面ヘパラン硫酸プロテオグライカンの存在がFGF-1の高親和性レセプターへの結合に必須であることも示された。またこの細胞で発現されるFGFレセプター(FGFR)はレセプター自体がヘパラン硫酸鎖を持ちヘパラン硫酸プロテオグライカンとして存在していることが示されている。PTr細胞では、FGFRはそのmRNAのaltenative splicingにより3個あるいは2個の免疫グロブリン様ドメインを持つ分子種として細胞表面に発現しており、それぞれ3個所および1個所のヘパラン硫酸合成開始可能アミノ酸配列(Ser-Gly)を持っている。これら2種類のFGFRをコードするcDNAおよびsite directed mutagenesisにより上記Ser残基をAlaに変更するcDNAを調製し、エクスプレッションベクターとともにこれらcDNAを複数種の細胞に強制発現することにより、どのSer-Glyドメインがヘパラン硫酸合成開始のアクセプターとなりうるかを同定した。その結果2個の免疫グロブリン様ドメインを持つ短縮型FGFRだけがヘパラン硫酸合成開始のアクセプターとなりうることを示した。また、細胞外カルシウム濃度変化によりPTr細胞は短時間のうちにFGFRの細胞表面への発現、あるいは細胞内へのtranslocationを行うことによりFGF-1に対する細胞の感受性を変化させる機構を持つことも明らかになった。これら本年度の研究結果をまとめると以下のとおりである。副甲状腺細胞株PTrにおいてその細胞増殖はおもにFGF-1のautocrine制御により調節されており、(1)細胞表面ヘパラン硫酸はFGF-1のFGFRに対する高親和性結合に必須である、(2)細胞はFGFRをコードするmRNAのaltermative splicing、FGFRのゴルジ装置でのヘパラン硫酸化、細胞外カルシウム濃度感知機構を介したtranslocationよる細胞表面へのFGFRの発現調節などにより、ヘパラン硫酸とFRF-1の相互作用を制御している機構の存在することが明らかとなった。

先前的研究表明，PTR细胞系的细胞增殖取决于细胞外液中的钙浓度，并且主要受FGF-1的自分泌控制调节。还已经表明，在这种FGF-1的作用机理中，细胞表面硫酸盐蛋白聚糖的存在对于与FGF-1的高亲和力受体结合至关重要。还已经显示，该细胞中表达的FGF受体（FGFR）具有乙酰硫酸盐链，并作为硫酸乙酰肝素蛋白聚糖存在。在PTR细胞中，FGFR通过mRNA的高度剪接在细胞表面上作为分子物种表达，具有三个或两个免疫球蛋白样结构域，并且具有分别启动乙酰硫酸盐合成（Ser-Gly）的三个和一个氨基酸序列。通过使用编码这两种类型的FGFR和位点的cDNA，定向诱变，将SER残基的cDNA与ALA的cDNA一起，并强行在多个细胞中与表达载体一起在多个细胞中表达这些cDNA，可以确定哪个Ser-Gly结构域可以是启动乙酰肝素硫酸盐同步的受体。结果表明，仅具有两个免疫球蛋白样结构域的截短FGFR可以成为乙par硫酸乙酰肝素合成的受体。还揭示了PTR细胞具有一种机制，可以通过在细胞表面上表达FGFR或在短时间内易位，这会改变细胞对FGF-1的敏感性，这是由于细胞外钙浓度的变化而导致的。今年这些研究的结果总结如下。在甲状旁腺细胞系PTR中，细胞增殖主要受FGF-1的自分泌控制调节，并且已经揭示（1）（1）细胞表面硫酸乙酰肝素对于FGF-1与FGFR的高亲和力是必不可少的，并且（2）细胞具有调节heparan spirna spirna seff frf-1的机制FGFR在高尔基体装置中的硫酸盐，并通过细胞外钙浓度感应机制通过易位来调节细胞表面上的FGFR表达。