ヒト食道上皮細胞の形質転換メカニズムの解明

阐明人食管上皮细胞转化机制

• 批准号: 22K19457
• 负责人: 垣内 伸之
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19457/
• 关键词: 食道癌; クローン進化; 食道がん; 発がん

食道がんは男性において7番目に多く、男女併せて年間約1万人強が死亡している。これまでの研究により、正常食道上皮は加齢や食道がんリスク因子への暴露によりがんドライバー変異クローンによって再構築されることが判明したが、正常上皮から異型上皮への形質転換メカニズムについては未だ詳細は不明である。本研究では微小検体採取技術とゲノム・トランスクリプトーム同時解析技術を用いて、発がん最初期におけるヒト食道上皮細胞の形質転換メカニズムを解明し、食道がんの発がん予防や発症前治療の開発に資する知見を得ることを目的としている。研究初年度である2022年度は様々な背景の患者の、ルゴール染色性粘膜、ルゴール不染帯、および腫瘍から検体を採取した。組織溶解により核酸を溶液中に放出させ、その後、核酸を精製することなく次世代シーケンサー用のライブラリを作成する技術を確立した。試験的に実施した細胞株100細胞からのシーケンスでは、ゲノムおよびトランスクリプトーム解析が可能であった。ルゴール不染帯は組織学的に正常から低異型性、高異型性、がんまで様々な病理像を呈するが、HE染色像に加えてTP53免染およびKi67免染を行う事で採取した粘膜の組織学的悪性度を評価したところ、ルゴール不染帯のサイズと悪性度の間に相関が見られた。このことに基づいて次年度はさらに多数の検体を採取し、高異型度病変に至るクローン進化を駆動する分子メカニズムの解明に挑む。

食管癌是男性中第七最常见的人，每年约10,000人死亡，男性和女性。先前的研究表明，正常的食管上皮是由癌症驱动器突变克隆在衰老和暴露于食管癌风险因素后重建的，但是关于从正常上皮细胞到非典型上皮细胞的转化机制的细节仍然不清楚。这项研究旨在通过使用微生物收集技术以及同时进行基因组和转录组分析技术，阐明人类食管上皮细胞的转化机制，并获得有助于预防癌变生成和预抑制治疗的知识。在研究的第一年，在2022年，从Lugol染色的粘膜，Lugol染色区域和各种背景患者的肿瘤收集了标本。已经建立了通过组织裂解将核酸释放到溶液中的技术，然后为下一代序列仪创建文库而不纯化核酸。从实验细胞系的100个细胞进行测序中，可以进行基因组和转录组分析。 Lugol Unstain的区域具有各种病理特征，从正常到低非典型，非典型癌症和癌症，但是当通过进行TP53的无TP53和Ki67无染色来收集的粘膜的组织学恶性肿瘤，除了他染色的图像之外，还建立了lugol-unsstem sears sears sears sears ne He染色的图像。基于此，明年我们将收集更多样品，以阐明驱动克隆进化的分子机制，从而导致高非典型病变。