非定型TCR複合体を形成する機能不全耐性T細胞集団の作出とがん治療への応用

创建可形成非典型 TCR 复合物的功能障碍抗性 T 细胞群及其在癌症治疗中的应用

• 批准号: 22K19455
• 负责人: 福島 祐二
• 金额: $ 4.08万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19455/
• 关键词: T細胞機能不全; 非定型TCR; 活性制御; がん

T細胞は生体内に発生したがん細胞を排除する働きを持つ。免疫チェックポイント阻害剤の臨床応用に代表される近年のがん免疫研究の発展により、T細胞に生じる機能不全の克服ががんの抑制に極めて重要であることが分かってきたが、その方途は十分には確立されていない。申請者らはこれまで、T細胞抗原受容体（TCR）に対する特定の制御分子の会合とそれに伴う活性化シグナル伝達の増強が機能不全の打開に寄与しうることを見出してきた。これに着想を得た本研究は、がん抗原との遭遇に応じてTCR構成因子（CD3サブユニット）を活性増強力のある改変型に置換し、機能不全に抵抗性を示すT細胞の作出法を開発する。さらに、本T細胞集団の投与により担がんマウスの抗腫瘍効果を向上させることを検討し、新たながん治療法創出に資する科学的な基盤を確立することを目指す。令和4年度はまず、計画当初に設計した改変型CD3z（CD3z細胞外領域にTCR制御に関与する細胞表面分子を連結させたタイプの改変型）を作製し、予備検討のためT細胞株へ遺伝子導入したが、細胞表面上に安定的に発現しない、TCRに取り込まれない等、性質や立体構造上の問題があることが示唆された。そこで、CD3z遺伝子ノックアウトT細胞株を作製し、これを用いて改変型CD3zの発現/TCR形成/活性増強効果の簡便な評価系を確立した。本評価系にて、シグナル伝達を向上しうる様々なタイプの分子設計を追加検討したところ、上記の問題についてはタンパク質の連結方法または改変部位の変更により解消しうることが分かってきた。また、がん抗原との遭遇に応じて改変型を発現させるためのプロモーター搭載ベクターの作製も行った。本研究の基礎となる研究成果については、原著論文として発表した。

T细胞起作用可消除体内发展的癌细胞。通过免疫检查点抑制剂的临床应用代表的癌症免疫研究的最新发展已证明，在T细胞中克服功能障碍对于抑制癌症极为重要，但该方法尚未完全确定。申请人先前已经发现，特定调节分子与T细胞抗原受体（TCR）的关联以及相关的增强激活信号传导可能有助于分解功能障碍。受此启发，这项研究将开发一种方法，通过用响应癌症抗原的响应有效的活性改性形式来代替TCR成分（CD3亚基）来产生对功能障碍的T细胞。此外，我们的目标是考虑通过管理该T细胞人群来改善癌症小鼠的抗肿瘤作用，并建立一个科学基础，该基础将有助于创造新的癌症治疗。在2022年，我们首先创建了我们在计划开始时设计的TCR对照的细胞表面分子与细胞外CD3Z区域相关的细胞表面分子与细胞表面分子相关联），并将该基因引入了T细胞系以进行初步检查，但建议在表面表达属性和完整表达的问题，或者不符合构图，或者不符合构图。因此，制备了CD3Z基因基因敲除T细胞系，使用此过程，建立了一个简单的评估系统，以表达，TCR形成和改进的CD3Z活性的增加。在此评估系统中，已经进一步研究了可以改善信号传导的各种类型的分子设计，并且发现可以通过更改蛋白质连接或修饰部位来解决上述问题。另外，还准备配备启动子的载体以响应遇到癌症抗原的响应来表达改良形式。构成这项研究基础的研究结果是作为原始论文发表的。

项目成果

cis interaction of CD153 with TCR/CD3 is crucial for the pathogenic activation of senescence-associated T cells

• DOI: 10.1016/j.celrep.2022.111373
• 发表时间: 2022-09-20
• 期刊: CELL REPORTS
• 影响因子: 8.8
• 作者: Fukushima, Yuji;Sakamoto, Keiko;Hattori, Masakazu
• 通讯作者: Hattori, Masakazu