自己学習型ウイルス抵抗性細胞の樹立に向けた技術基盤の開発

建立自学习抗病毒细胞技术平台开发

基本信息

批准号：
22K19436
负责人：
本田知之
金额：
$ 4.16万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-06-30 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

近年、iPS細胞や幹細胞を用いた細胞治療が次々と開発されている。細胞治療では、治療に有効な細胞（ドナー細胞）を作りそれを患者（レシピエント）体内に導入することで、治療効果を発揮する。その際に、貴重なドナー細胞がレシピエントに拒絶されないよう、免疫抑制剤を併用する。免疫抑制剤存在下では、十分な免疫応答が期待できないため、感染症リスクが存在する。貴重なドナー細胞へのウイルス感染や感染による損害を防ぐためには、ワクチンによる免疫賦活化が有効であるが、免疫抑制剤併用下では十分な効果は期待できない。もし、免疫抑制剤の影響を受けないウイルス抵抗性の付与方法を開発することができれば、細胞治療の有用性を高めることにつながると考えられる。本研究では、ゲノムに取り込んだウイルス配列が持つ抗ウイルス活性に着目し、ウイルス配列のゲノムへの取り込み現象を安全にかつ高確率に発生させる「自己学習型ウイルス抵抗性細胞」の作出の技術基盤を検討した。本年度の研究においては、この現象を触媒するレトロエレメントLINE-1の活性調整に関して、以下に示す結果を得た。（１）一卵性双生児検体を用いて、LINE-1の発現が他の遺伝子の発言に比べて、環境要因の影響を受けやすいことを明らかにした。CAGEを用いて、その発現を制御するモチーフ検索を行なったが、各双生児ペアで共通するモチーフの発見には至らなかった。（２）LINE-1の活性を制御する宿主因子を、shRNAライブラリーを作成しスクリーニングした。その結果、LINE-1活性を増強すると考えられる宿主因子の同定に至った。このように本年度は、「自己学習型ウイルス抵抗性細胞」の作出について、予定通りの成果を挙げることができた。

近年来，利用iPS细胞和干细胞的细胞疗法相继开发出来。细胞疗法通过产生对治疗有效的细胞（供体细胞）并将其引入患者（接受者）体内来产生治疗效果。此时，联合使用免疫抑制剂，可以防止有价值的供体细胞被受体排斥。在存在免疫抑制剂的情况下，无法预期产生足够的免疫反应，因此存在感染的风险。为了防止病毒感染和感染对有价值的供体细胞造成的损害，使用疫苗的免疫激活是有效的，但与免疫抑制剂联合使用时不能预期足够的效果。如果我们能够开发出一种不受免疫抑制剂影响的赋予病毒抵抗力的方法，人们认为这将提高细胞疗法的实用性。在这项研究中，我们重点研究了病毒序列整合到基因组中的抗病毒活性，并重点研究了创建“自我学习的抗病毒细胞”的技术基础，该细胞可以安全且高概率地将病毒序列整合到基因组中。经过考虑的。在今年的研究中，我们获得了以下有关催化这一现象的逆转录元件 LINE-1 活性调节的结果。 (1)使用同卵双胞胎样本，我们发现LINE-1表达比其他基因的表达更容易受到环境因素的影响。我们使用 CAGE 来寻找控制其表达的基序，但我们无法找到每对双胞胎共有的基序。 (2) 创建 shRNA 文库并筛选控制 LINE-1 活性的宿主因子。结果，我们发现了一种被认为可以增强 LINE-1 活性的宿主因子。这样，今年我们在“自学习抗病毒细胞”的生产上就能够按计划取得成果。