腫瘍由来新規骨形成抑制分子の機能解析と発現制御

肿瘤源性新型骨形成抑制分子的功能分析及表达调控

• 批准号: 22K19626
• 负责人: 寺町 順平
• 金额: $ 4.08万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19626/
• 关键词: 骨髄腫; 骨芽細胞; NEO1; 骨髄腫; 骨芽細胞; NEO1

本研究では、新規骨形成抑制因子Neogenin1（NEO1）の骨芽細胞分化抑制機序および腫瘍細胞からの産生機序を解明し、腫瘍による骨病変形成の病態解明および新規治療法への開発へとつなげる。さらに、患者血清中のNEO1濃度を計測し、骨病変との関連を臨床病理学的に解析し、バイオマーカーとしての可能性を検討する。今年度の研究実績は以下のとおりである。①MC3T3-E1を用いた骨芽細胞培養系にリコンビナントNEO1（rNEO1)を添加し、骨芽細胞分化をAlizarin Red染色・von Kossa染色や各種骨芽細胞分化マーカーの発現を検討し評価をしたところ、rNEO1は骨芽細胞分化を顕著に抑制した。②BMPとNEO1をpreincubationさせ、血清スタベーションしたMC3T3-E1に添加し、骨芽細胞分化促進シグナルであるBMPシグナルの解析を行ったところ、rNEO1はBMP2に誘導されるSmad1/5/8のリン酸化抑制した。このことから、rNEO1はBMP2と結合し、BMP2の囮受容体として作用することが示唆された。③徳島大学血液内科の協力のもと、患者検体から組織アレイを作製し、骨髄腫細胞でのNEO1の発現を検討したところ、すべての患者で高発現していることが明らかとなった。

这项研究将阐明抑制肿瘤细胞成骨细胞分化和生产机制的机制，从而阐明肿瘤诱导的骨病变形成和新疗法的发育。此外，测量了患者血清中NEO1的浓度，并在临床上分析了与骨骼病变的关联，并检查了其作为生物标志物的潜力。今年的研究结果如下：1）重组NEO1（RNEO1）使用MC3T3-E1添加到成骨细胞培养系统中，并通过检查α-氨基化染色，von kossa染色，以及各种成骨细胞分化标记的表达来评估成骨细胞分化。 RNEO1显着抑制了成骨细胞分化。 2）预孵育BMP和NEO1并将其添加到血清固定的MC3T3-E1中，BMP信号的分析是促进成骨细胞分化的信号，表明RNEO1抑制了BMP2诱导的SMAD1/5/8磷酸化。这表明RNEO1与BMP2结合并充当BMP2的诱饵受体。 ③在Toushima University血液学系的合作下，从患者标本中制备了组织阵列，并检查了NEO1在骨髓瘤细胞中的表达，并发现它在所有患者中都高度表达。