間接半導体レーザー励起蛍光検出法による無機イオンの超高感度検出

间接半导体激光激发荧光检测法超高灵敏度检测无机离子

基本信息

批准号：
08750940
负责人：
金田隆
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

キャピラリー電気泳動によって分離した無機イオンを半導体レーザー励起蛍光法を用いて高感度に検出する手法について検討した。装置には半導体レーザー励起蛍光検出器を備えた自作のキャピラリー電気泳動装置を用いた。半導体レーザーの発振波長は660nmである。まず、蛍光性色素を含む緩衝溶液を泳動溶液に用い、電気的中性の原理に基づく無機陰イオンの検出を試みたところ、十分な感度を得ることができなかった。これは色素と無機陰イオンとの移動度に大きな差があることに起因するものと推測される。そこで泳動溶液としてミセル溶液を用い、分配平衡の変化を利用する無機陰イオンの検出方法について検討した。この方法の検出原理は以下のように説明できる。蛍光色素はミセル中では水中よりも蛍光強度が大きい。一方、過剰の無機イオンの存在下では蛍光色素のミセルへの分配は抑制されるため、無機イオンを負の信号として検出することができる。10μMのオキサジン750を含むテトラデシルトリメチルアンモニウム溶液を泳動溶液として無機陰イオンの分離、検出をおこなったところ、比較的疎水性の高いヨウ化物イオン、チオシアン酸イオンなどの無機陰イオンが大きな負の信号を与えることが明らかとなった。すなわち本手法では疎水性の高い無機イオンをより選択的に検出できる。このとき試料濃度で数十μMレベル、絶対量では数十フェムトモルレベルのヨウ化物イオンを検出することが可能であった。

我们研究了一种使用半导体激光激发荧光检测通过毛细管电泳分离的无机离子的高灵敏度方法。使用自制的毛细管电泳装置，配有半导体激光激发荧光检测器。半导体激光器的振荡波长为660nm。首先，尝试使用含有荧光染料的缓冲溶液作为电泳溶液，基于电中性原理来检测无机阴离子，但无法获得足够的灵敏度。推测这是由于染料和无机阴离子之间的迁移率差异较大。因此，我们使用胶束溶液作为电泳溶液，研究了利用分布平衡的变化来检测无机阴离子的方法。该方法的检测原理可以解释如下。荧光染料在胶束中的荧光强度比在水中的荧光强度高。另一方面，在过量无机离子存在的情况下，荧光染料在胶束中的分布受到抑制，因此无机离子可以作为负信号被检测到。当使用含有10μM恶嗪750的十四烷基三甲基铵溶液作为电泳溶液来分离和检测无机阴离子时，明显的是，相对疏水性的无机阴离子如碘离子和硫氰酸根离子给出了大的负信号。换句话说，通过该方法，可以更有选择性地检测高疏水性无机离子。此时，可以以几十μM的样品浓度和几十飞摩尔的绝对量检测碘离子。