細胞内酸化的損傷のモニタリングシステムを用いた新規抗酸化成分の究明

利用细胞内氧化损伤监测系统研究新型抗氧化成分

• 批准号: 08760118
• 负责人: 村上 明
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kinki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08760118/
• 关键词: superoxide; hydroperoxide; HL-60 cells; flow cytometer; chemoprevention; oxidative stress; anti-tumor promoter; leukocyte; superoxide; hydroperoxide; HL-60 cells; flow cytometer; chemoprevention; oxidative stress; anti-tumor promoter; leukocyte

脂肪酸、あるいはそのエステルなどを用いた従来の抗酸化試験は、溶媒、温度、脂肪酸の種類によって抗酸化活性の評価に再現性や統一性が認められない例も多い。そこで本研究では、細胞内hydroperoxide(ROOH)の産生に対する抑制活性をモニターすることにより、新規抗酸化成分の究明を試みた。HL-60細胞をDMSOにより顆粒球様細胞へと分化させ、発癌プロモーターである12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate(TPA)によって生成するROOHを蛍光標識し、flow cytometerで解析した。スクリーニングによって抑制活性の認められた野菜類から抗酸化物質を検索したところ、1'-acetoxychavicol acetate(ACA)(Languas galanga、和名:ナンキョウ)、pheophorbite a(Neptunia oleracea、和名:ミズオジギソウ)、AL-1とAL-2(Artemisia latiflora、和名:ヨモギナ)、およびauraptene(Citrus natsudaidai、和名:ナツミカン)が単離できた。以上の化合物は、細胞内NADPH oxidase系の抑制によりsuperoxide産生量を減少させ、その結果ROOH量が低下したものと推察された。これら全ての物質にマウス皮膚癌プロモーション抑制活性が認められたが、さらにACAとaurapteneは、経口投与でも、ラット口腔および大腸発癌を著名に抑制した。以上の研究結果は、細胞内酸化的損傷のモニタリングシステムを用いた評価法が、新規抗酸化物質や発癌抑制物質の究明に極めて有用であることを示すものである。

在许多情况下，使用脂肪酸或其酯的常规抗氧化剂测试在评估抗氧化活性时不会表现出可重复性或均匀性，具体取决于溶剂，温度和脂肪酸类型。因此，在这项研究中，我们试图通过监测细胞内氢过氧化物（ROOH）生产的抑制活性来研究新型的抗氧化剂成分。通过DMSO将HL-60细胞分化为粒细胞细胞，并通过荧光标记并使用流动细胞仪对致癌启动子12-O-四烯酰基-13-乙酸酯（TPA）产生的ROOH进行荧光标记并分析。 When antioxidants were searched from vegetables that had inhibitory activity by screening, 1'-acetoxychavicol acetate (ACA) (Languas galanga, Japanese name: Nankyo), pheophorbite a (Neptunia oleracea, Japanese name: Natsumida), AL-1 and AL-2 (Artemisia latiflora, Japanese name: Mugwort), and auraptene (Citrus Natsudaii，日语名称：Natsumikan）。据估计，上述化合物通过抑制细胞内NADPH氧化物系统减少了产生的超氧化物量，从而减少了ROOH量的降低。所有这些物质都被发现具有抗小鼠皮肤癌促进活性，但是即使口服给药，ACA和Auraptene也会显着抑制大鼠口腔和结肠癌的发生。上述研究结果表明，使用监测系统进行细胞内氧化损伤的评估方法对于研究新型抗氧化剂和致癌抑制剂非常有用。