ウシの「ルーメン代謝－肝臓機能」を応用した飼料由来有害物質の毒性評価法

应用牛“瘤胃代谢-肝功能”的饲料源性有毒物质毒性评价方法

• 批准号: 26450417
• 负责人: 吉岡 都
• 金额: $ 3.24万
• 依托单位: National Agriculture and Food Research Organization
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-26450417/
• 关键词: 獣医学; 毒性評価; ウシ; ルーメン; かび毒

ウシにおける有害化学物質の毒性評価のため、簡易人工ルーメン培養法とウシ由来肝臓細胞培養系を組み合わせた新規の毒性評価法を確立することを目的とし、ウシの毒性評価に適した簡易人工ルーメン培養法の検討を行った。ホルスタイン牛の第一胃に装着したフィステルから、飼料給与約４時間後に第一胃内容液を採取し、二重ガーゼでろ過した。このルーメン液（RJ）のみ（100%RJ）、RJとMcDougall人工唾液（Buffer）との1:1混合液（50%RJ）およびBufferのみを三角コルベンに10ml採取し、窒素ガスを封入して密栓し、温水槽にて40℃、150rpmで振とう培養を行った。培養直後の100%RJには活発に動き回るプロトゾアが観察されたが、24時間後には約1/10以下に減少していた。一方、100%RJの培養24時間後のpHは0時間に比べて、大きな変動は認められなかった。また、ルーメン培養液中の総VFA量や酢酸/プロピオン酸比も変化はなく、正常の範囲内であった。さらに、ルーメン代謝後の有毒物質を評価するために、フザリウム属かび毒のうち、デオキシニバレノール（DON）またはゼアラレノン(ZEA)をルーメン液に添加すると、100%RJでは24時間後には培養直後のDONの約60%、ZEAの約35%に減少していた。また、50%RJでは同様の減少が認められたが、低下の割合はともに約20％に留まった。一方、プロトゾア等を失活させたRJでは、24時間後のDONおよびZEAの分解活性は認められなかった。DONの減少が認められた培養24時間後のRJには、脱エポキシ体の代謝物のピークが認められた。以上のことから、本培養法は、培養24時間までpHやVFA濃度が維持されたルーメン機能を保持しており、ウシにおけるDONおよびZEAの分解能を評価できることが明らかとなった。

为了评估母牛中有害化学物质的毒性评估，目的是建立一种新的毒性评估方法，将简单的人造腔培养方法与肝细胞培养系统结合起来，是一种简单的人工流明培养物，适合对毒性评估牛。喂食后约4小时，从附着在荷斯坦牛肉的第一胃的瘘管中收集了第一个胃含量，并将双纱布用双纱布过滤。只有该管腔溶液（RJ）（100％RJ），1：1混合物（50％RJ）和带有RJ和McDougall人工唾液（缓冲液）的缓冲液是10 ml三角形的Corven，氮气被封闭在40°C和150 rpm的加热罐中制成并培养。培养后立即有100％的RJ具有生动的原生动物，但在24小时后不到1/10。另一方面，在RJ后24小时未识别出100％RJ培养后的pH值为0小时。另外，流腔培养物中的总VFA量和乙酸/丙酸的比率在正常范围内。此外，为了评估腔内代谢后的有毒物质，如果您在fuzalium和Poison的腔液溶液中添加右利甲醇（DON）或Zearrarenone（Zea），则100％RJ是24小时后的。 Zea的35％。此外，在50％的RJ中也认识到同样的下降，但降低速度约为20％。另一方面，制作原生动物等的RJ并未在24小时后识别Don和Zea的分解活性。 DON减少24小时后的RJ被发现在环氧体中具有代谢产物的峰值。从上面可以清楚地看出，这种培养已经保持了pH和VFA浓度的管腔功能，直到24小时培养，并且可以评估牛中Don和Zea的分辨率。

项目成果

簡易人工ルーメン培養を用いたフザリウム属マイコトキシンの分解能評価

使用简单的人工腔培养对镰刀菌毒素的分离进行评估

• 发表时间: 2016
• 作者: 吉岡 都;上垣隆一;高橋雄治;澤田 浩;新井鐘蔵;山中典子
• 通讯作者: 山中典子