ウシの「ルーメン代謝－肝臓機能」を応用した飼料由来有害物質の毒性評価法

应用牛“瘤胃代谢-肝功能”的饲料源性有毒物质毒性评价方法

• 批准号: 26450417
• 负责人: 吉岡 都
• 金额: $ 3.24万
• 依托单位: National Agriculture and Food Research Organization
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-26450417/
• 关键词: 獣医学; 毒性評価; ウシ; ルーメン; かび毒

ウシにおける有害化学物質の毒性評価のため、簡易人工ルーメン培養法とウシ由来肝臓細胞培養系を組み合わせた新規の毒性評価法を確立することを目的とし、ウシの毒性評価に適した簡易人工ルーメン培養法の検討を行った。ホルスタイン牛の第一胃に装着したフィステルから、飼料給与約４時間後に第一胃内容液を採取し、二重ガーゼでろ過した。このルーメン液（RJ）のみ（100%RJ）、RJとMcDougall人工唾液（Buffer）との1:1混合液（50%RJ）およびBufferのみを三角コルベンに10ml採取し、窒素ガスを封入して密栓し、温水槽にて40℃、150rpmで振とう培養を行った。培養直後の100%RJには活発に動き回るプロトゾアが観察されたが、24時間後には約1/10以下に減少していた。一方、100%RJの培養24時間後のpHは0時間に比べて、大きな変動は認められなかった。また、ルーメン培養液中の総VFA量や酢酸/プロピオン酸比も変化はなく、正常の範囲内であった。さらに、ルーメン代謝後の有毒物質を評価するために、フザリウム属かび毒のうち、デオキシニバレノール（DON）またはゼアラレノン(ZEA)をルーメン液に添加すると、100%RJでは24時間後には培養直後のDONの約60%、ZEAの約35%に減少していた。また、50%RJでは同様の減少が認められたが、低下の割合はともに約20％に留まった。一方、プロトゾア等を失活させたRJでは、24時間後のDONおよびZEAの分解活性は認められなかった。DONの減少が認められた培養24時間後のRJには、脱エポキシ体の代謝物のピークが認められた。以上のことから、本培養法は、培養24時間までpHやVFA濃度が維持されたルーメン機能を保持しており、ウシにおけるDONおよびZEAの分解能を評価できることが明らかとなった。

为了评估牛有害化学物质的毒性，我们研究了一种简单的人造腔培养方法，该方法将简单的人造腔培养方法与牛衍生的肝细胞培养系统结合在一起。瘤胃含量是从喂食后大约4小时的4小时后从附着在霍尔斯坦奶牛瘤胃的瘘管中收集的，并通过双纱布过滤。单独使用10 mL该管腔溶液（RJ）（100％RJ），1：1的RJ和McDougall人造唾液（缓冲液）的混合物（缓冲液）和仅在三角形的Corbene中收集，并用氮气密封，密封，密封，并在40°C和150 rpm的温水水箱中进行摇动培养。培养后立即在100％RJ中观察到积极移动的原生动物，但是24小时后降至约1/10。另一方面，与0小时相比，在100％RJ培养后24小时培养后，pH值未观察到显着变化。此外，流明培养基中的VFA总量和乙酸/丙酸比率保持在正常范围内。此外，为了评估瘤胃代谢后的有毒物质，当将脱氧基因烯醇（DON）或searalenone（Zea）（Zea（Zea））添加到瘤胃溶液中时，培养后立即将100％的RJ降低至约60％的DON，培养后24小时后约35％。此外，在50％RJ时观察到类似的下降，但两种降低率仅约为20％。另一方面，在RJ中，原生动物等被停用，在24小时后未观察到DON或ZEA的降解活性。在培养24小时后，在RJ中观察到深氧代谢产物的峰值，观察到DON的降低。从上面可以看出，主要培养方法保留了腔功能，其中将pH和VFA浓度保持多达24小时的培养，从而评估牛在牛中的DON和ZEA的分辨率。

项目成果

簡易人工ルーメン培養を用いたフザリウム属マイコトキシンの分解能評価

使用简单的人工腔培养对镰刀菌毒素的分离进行评估

• 发表时间: 2016
• 作者: 吉岡 都;上垣隆一;高橋雄治;澤田 浩;新井鐘蔵;山中典子
• 通讯作者: 山中典子