ヒト四肢先天性縦列形成障害における形態形成遺伝子群の役割 -ラツトモデルを用いて-

形态发生基因在人类肢体先天性串联形成障碍中的作用 - 使用大鼠模型 -

• 批准号: 09877281
• 负责人: 三波 明男
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877281/
• 关键词: 四肢の発生; 上肢先天異常; 撓側列欠損; 縦軸欠損; 形態形成遺伝子; 橈側列欠損; 肢芽細胞死; 皮膚紋理

これまで私達は妊娠ラットにMyleranを投与し胎仔に誘発した撓側列欠損に対して肢芽の細胞死と妊娠末期胎児の手掌の皮膚紋理を観察し,妊娠12.0日前後に臨界期があること,肢芽発生時期における肢芽全体、または掌側に認められる間葉細胞の壊死が撓側列欠損の形成に関与していること、細胞の分裂増殖に関与するシグナル異常が、成因であることを報告した。今回は本症の成因をさらに検討するために,本モデルにおける形態形成遺伝子の解析を行った。解析は,肢芽の前後軸を決定している,shh,Hoxd-11,Hoxd-12,Hoxd-13に関して行った。正常な肢芽において,shhは肢芽後端の中枢葉領域(極性化活性帯)に認められる。Hoxd遺伝子は脊柱動物のホメオボックス遺伝子でありHoxd-11,Hoxd-12は肢芽の後半部で、Hoxd-13は手関節より遠位で特異的に発現することが分かっている。妊娠10.0日目のWKAH/Hkmラットに20mg/kgのMyleranを投与し,妊娠12.0〜13.0日の間に母ラットを開腹して胎仔を取り出した。また,妊娠12.0〜13.0日の対照群も採取した。in situハイブリダイゼーションを行ない,対照群とMyleran投与群におけるshh,Hoxd-11,Hoxd-12,Hoxd-13の発現を実体顕微鏡下で比較検討した。観察した胎仔数はshh,Hoxd-11,Hoxd-12,Hoxd-13とも10匹,対照群は各4匹であった。対照群と比較したMyleran投与群においてshhおよび,Hoxd-11,Hoxd-12,Hoxd-13の形態形成遺伝子の発現部位に差異は認められなかった。前回報告した実験で,ラットの撓側列欠損の肢芽的細胞死は撓側に限局しなかったことから,肢芽発生時期における形態形成遺伝子の関与が考えられた。

到目前为止，到目前为止，我们已经对怀孕的大鼠进行了杀虫剂，以观察胎儿诱发的胎儿的细胞死亡以及胎儿诱导的胎儿皮肤模式，并报告说，怀孕的12.0天左右存在一个关键时期，在整个肢体芽或在远处涉及的象征性范围内观察到的间充质细胞的坏死在整个肢体芽中涉及的象征及其在象征中涉及的象征，既涉及象征性的forter the Inderiatient conderiatient condery condery cons and the the Inderiation in and the in and the the in the -fortiation in and the the形成的范围均在范围内的形成范围。细胞分裂是原因。在本文中，我们分析了该模型中的形态学基因，以进一步研究该疾病的原因。在SHH，HOXD-11，HOXD-12和HOXD-13上进行了分析，该分析确定了肢体芽的前后轴。在正常的肢体芽中，在肢体后端的中央叶区（极化区）中发现了SHH。 HOXD基因是椎动物中的同型基因基因，已经发现HOXD-11和HOXD-12在肢体芽的后期特别表达，而HOXD-13则特别表达了腕关节远端。怀孕第10.0天的WKAH/HKM大鼠被给予20 mg/kg myleran，在怀孕的第12.0天和13.0天之间，母亲大鼠腹腔发开并去除胎儿。此外，收集了12.0至13.0天的对照组。进行原位杂交，并在对照组中SHH，HOXD-11，HOXD-12和HOXD-13的表达表达，并在立体显微镜下比较了Myleran处理的组。观察到的胎儿的数量为10，shh，hoxd-11，hoxd-12和hoxd-13，在对照组中有4个。与对照组相比，在Myleran处理组中，SHH和HOXD-11，HOXD-12和HOXD-13形态学基因的表达位点没有差异。在先前的实验中，大鼠屈曲行缺陷中的肢体爆炸细胞死亡未定位在屈曲侧，因此被认为是肢体芽发育期间形态学基因的参与。

项目成果

小瀧宏明、三浪明男 他: "撓側列欠損の成因に関する研究"第41回日本手の外科学会. (1998)

Hiroaki Kotaki、Akio Minami 等：“侧柱缺陷原因的研究”第 41 届日本手外科学会（1998 年）。

小瀧宏明、三浪明男 他: "ラット撓側列欠損発生のメカニズム-形態形成遺伝子群の解析"第14回日本整形外科学会基礎学術集会. (1999)

Hiroaki Kotaki、Akio Minami 等人：“大鼠侧行缺陷的产生机制 - 形态发生基因的分析”第 14 届日本骨科学会基础科学会议（1999 年）。

小瀧宏明、三浪明男 他: "ラット撓側列欠損モデルにおける胚芽細胞死と皮膚紋理の解析"日本手の外科学会雑誌. 15. 799-802 (1999)

Hiroaki Kotaki、Akio Minami 等人：“大鼠侧行缺陷模型中胚胎细胞死亡和皮肤模式的分析”日本手外科学会杂志 15. 799-802 (1999)。

小瀧宏明、三浪明男 他: "ラット撓側列欠損モデルの皮膚紋理の解析"第38回日本先天異常学会学術集会. (1998)

Hiroaki Kotaki、Akio Minami 等人：“大鼠侧排缺陷模型中的皮肤模式分析”，日本先天缺陷学会第 38 届年会（1998 年）。

小瀧宏明、三浪明男 他: "ラット撓側列欠損の発生メカニズム-胚芽細胞死と皮膚紋理の解析-"第17回日本整形外科学会基礎学術集会. (1998)

Hiroaki Kotaki、Akio Minami 等人：“大鼠侧柱缺陷的发生机制 - 胚胎细胞死亡和皮肤模式的分析 -”第 17 届日本骨科学会基础科学会议（1998 年）。