ヒト四肢先天性縦列形成障害における形態形成遺伝子群の役割 -ラツトモデルを用いて-

形态发生基因在人类肢体先天性串联形成障碍中的作用 - 使用大鼠模型 -

• 批准号: 09877281
• 负责人: 三波 明男
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877281/
• 关键词: 四肢の発生; 上肢先天異常; 撓側列欠損; 縦軸欠損; 形態形成遺伝子; 橈側列欠損; 肢芽細胞死; 皮膚紋理

これまで私達は妊娠ラットにMyleranを投与し胎仔に誘発した撓側列欠損に対して肢芽の細胞死と妊娠末期胎児の手掌の皮膚紋理を観察し,妊娠12.0日前後に臨界期があること,肢芽発生時期における肢芽全体、または掌側に認められる間葉細胞の壊死が撓側列欠損の形成に関与していること、細胞の分裂増殖に関与するシグナル異常が、成因であることを報告した。今回は本症の成因をさらに検討するために,本モデルにおける形態形成遺伝子の解析を行った。解析は,肢芽の前後軸を決定している,shh,Hoxd-11,Hoxd-12,Hoxd-13に関して行った。正常な肢芽において,shhは肢芽後端の中枢葉領域(極性化活性帯)に認められる。Hoxd遺伝子は脊柱動物のホメオボックス遺伝子でありHoxd-11,Hoxd-12は肢芽の後半部で、Hoxd-13は手関節より遠位で特異的に発現することが分かっている。妊娠10.0日目のWKAH/Hkmラットに20mg/kgのMyleranを投与し,妊娠12.0〜13.0日の間に母ラットを開腹して胎仔を取り出した。また,妊娠12.0〜13.0日の対照群も採取した。in situハイブリダイゼーションを行ない,対照群とMyleran投与群におけるshh,Hoxd-11,Hoxd-12,Hoxd-13の発現を実体顕微鏡下で比較検討した。観察した胎仔数はshh,Hoxd-11,Hoxd-12,Hoxd-13とも10匹,対照群は各4匹であった。対照群と比較したMyleran投与群においてshhおよび,Hoxd-11,Hoxd-12,Hoxd-13の形態形成遺伝子の発現部位に差異は認められなかった。前回報告した実験で,ラットの撓側列欠損の肢芽的細胞死は撓側に限局しなかったことから,肢芽発生時期における形態形成遺伝子の関与が考えられた。

过去，我们观察到肢体芽的细胞死亡和怀孕末期的胎儿的皮肤峰以及胎儿的胎儿的皮肤rest to胎儿胎儿的胎儿胎儿的皮肤，这些柔性线被施用给胎儿大鼠并引起胎儿。 ，妊娠约12.0天，在肢体芽时识别在棕榈侧的叶片细胞的坏死或信号异常是原因。这次，为了进一步考虑这种疾病的原因，我们分析了该模型中形式的基因。进行了与SHH，HOXD-11，HOXD-12和HOXD-13进行的分析，该分析确定了肢体芽的前轴。在正常的肢体芽中，SHH在肢体芽的中心（极化活性）中被识别。 HOXD基因是脊柱动物的家用盒子基因，HOXD-11和HOXD-12在肢体芽的后半部分，而HOXD-13比手部关节特定。他在怀孕的10.0天在WKAH/HKM大鼠上施用了20 mg/kg的Myleran，并将其母亲的大鼠在怀孕的12.0至13.0天之间，并去除了胎儿。此外，收集了怀孕12.0至13.0天的对比组。进行原位杂交，并在受控组中SHH，HOXD-11，HOXD-12和HOXD-13的表达进行了比较，并在该物质下比较了Myleran给药组。 SHH，HOXD-11，HOXD-12和HOXD-13观察到的胎儿数量均为10，并且对比组分别为4个。与受控组相比，在Myleran给药组中，SHH和HOXD-11，HOXD-12和HOXD-13的形式形成基因的表达没有差异。在上一报道的实验中，大鼠不仅限于由于颠簸线而导致的芽状细胞死亡，因此考虑了肢体芽时形式形式的基因。

项目成果

小瀧宏明、三浪明男 他: "撓側列欠損の成因に関する研究"第41回日本手の外科学会. (1998)

Hiroaki Kotaki、Akio Minami 等：“侧柱缺陷原因的研究”第 41 届日本手外科学会（1998 年）。

小瀧宏明、三浪明男 他: "ラット撓側列欠損発生のメカニズム-形態形成遺伝子群の解析"第14回日本整形外科学会基礎学術集会. (1999)

Hiroaki Kotaki、Akio Minami 等人：“大鼠侧行缺陷的产生机制 - 形态发生基因的分析”第 14 届日本骨科学会基础科学会议（1999 年）。

小瀧宏明、三浪明男 他: "ラット撓側列欠損モデルにおける胚芽細胞死と皮膚紋理の解析"日本手の外科学会雑誌. 15. 799-802 (1999)

Hiroaki Kotaki、Akio Minami 等人：“大鼠侧行缺陷模型中胚胎细胞死亡和皮肤模式的分析”日本手外科学会杂志 15. 799-802 (1999)。

小瀧宏明、三浪明男 他: "ラット撓側列欠損モデルの皮膚紋理の解析"第38回日本先天異常学会学術集会. (1998)

Hiroaki Kotaki、Akio Minami 等人：“大鼠侧排缺陷模型中的皮肤模式分析”，日本先天缺陷学会第 38 届年会（1998 年）。

小瀧宏明、三浪明男 他: "ラット撓側列欠損の発生メカニズム-胚芽細胞死と皮膚紋理の解析-"第17回日本整形外科学会基礎学術集会. (1998)

Hiroaki Kotaki、Akio Minami 等人：“大鼠侧柱缺陷的发生机制 - 胚胎细胞死亡和皮肤模式的分析 -”第 17 届日本骨科学会基础科学会议（1998 年）。