ウイロイド－ノンコーディング環状ＲＮＡ分子の組換え・欠損変異体と自己複製能

类病毒-非编码环状RNA分子的重组/缺陷突变体和自我更新能力

• 批准号: 12J01941
• 负责人: 対馬 太郎
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Iwate University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J01941/
• 关键词: ウイロイド; コリウス; ダリア; 種子伝染; 分子内ループ; 欠損変異分子; CbVd; PSTVd

日本産コリウスから検出・同定した国内未報告のCbVd-5の宿主域と病原性を調査するために、レモンバーム、バジル、コリウスを用いて接種試験を行った。5カ月間にわたり感染の有無をノザンブロット法で調査した結果、CbVd-5は、レモンバームとバジルに感染しないことを明らかにした。CbVd-1とCbVd-6ではこれらの植物に感染性を示すことから、CbVd-5は、CbVd-1及びCbVd-6とは宿主域が異なることを明らかにした。DLVdは、ウイロイド分子内にHostuviroid属とPospiviroid属のウイロイド群に特異的な配列を併せ持つ極めて異例なウイロイドであるということ、さらに、ダリア、ジャガイモ、トマト、キュウリそしてタバコを用いた接種試験では、ダリア以外に感染せず、極めて宿主範囲が限定的なウイロイドであることが報告されている。本研究では、国産ダリアから初めてDLVdを単離・同定し、Hostuviroid属の主な宿主であるホップで接種試験を行った。その結果、ホップにおいても感染性を示さず、DLVdの宿主域が極めて限定的であることをさらに特徴づけた。CbVd-1を対象とした種子伝染性調査の過程で、種子伝染率の異なるCbVd-1変異体の比較から、2塩基の変異に注目した。今年度行ったM-foldでの二次構造解析の結果、新たに、それらの2塩基の変異箇所において形成される分子内ループ構造が異なることを明らかにした。ウイロイド分子内ループ構造は、宿主植物内でのウイロイド細胞間移行に関与することが明らかになっている。さらに、ウイロイドの種子伝染には、胚珠への侵入が必要であることを考慮すると、CbVd-1のループ構造の変異がコリウス胚珠への侵入に関与していることが示唆された。すなわち、CbVd-1の種子伝染性を制御している可能性のある分子構造を明らかにした。

为了调查日本尚未报道、从日本锦紫苏中检测到的CbVd-5的宿主范围和致病性，我们使用蜜蜂花、罗勒和锦紫苏进行了接种试验。经过五个月的时间使用 Northern blotting 调查是否存在感染，结果表明 CbVd-5 不会感染柠檬香脂和罗勒。由于CbVd-1和CbVd-6对这些植物表现出感染性，因此表明CbVd-5具有与CbVd-1和CbVd-6不同的宿主范围。 DLVd是一种极其不寻常的类病毒，其类病毒分子中具有Hostubiroid和Pospiviroid属类病毒群特有的序列，据报道，它是一种不会感染其他人且宿主范围极其有限的类病毒。本研究首次从家养大丽花中分离鉴定出DLVd，并用Hostubiroid属的主要宿主啤酒花进行了接种试验。结果，DLVd即使在啤酒花中也没有表现出感染性，进一步表明DLVd的宿主范围极其有限。在针对CbVd-1的种子传播力研究过程中，我们通过比较不同种子传播率的CbVd-1突变体来关注二核苷酸突变。今年利用M-fold进行二级结构分析的结果，我们新发现两个碱基突变位点形成的分子内环结构是不同的。研究表明，类病毒分子内环结构参与宿主植物内类病毒细胞间的运动。此外，考虑到类病毒种子传播需要侵入胚珠，因此表明CbVd-1环结构的突变与侵入锦紫苏胚珠有关。换句话说，我们揭示了可能控制CbVd-1种子传播能力的分子结构。

项目成果

コリウスウイロイド1と6の分子構造と感染性の比較

锦紫苏类病毒1和6的分子结构和感染性比较

• 发表时间: 2013
• 作者: 対馬太郎・松本真衣・佐野輝男

Molecular and biological characterization of Potato spindle tuber viroid and Dahlia latent viroid in dahlia cultivated in Japan

日本栽培大丽花中马铃薯纺锤形块茎类病毒和大丽花潜伏类病毒的分子和生物学特征

• 发表时间: 2013
• 作者: Taro Tsushima

Molecular characterization of Potato spindle tuber viroid-derived and non-related circular RNAs from dahlia

来自大丽花的马铃薯纺锤块茎类病毒来源和非相关环状 RNA 的分子特征

• 发表时间: 2012
• 作者: Taro Tsushima; Teruo Sano
• 通讯作者: Teruo Sano