ヨーロッパ腐蛆病の発病機構の解明

阐明欧洲腐烂病的发病机制

基本信息

批准号：
25292200
负责人：
高松大輔
金额：
$ 9.24万
依托单位：
National Agriculture and Food Research Organization
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-25292200/
关键词：
昆虫病原微生物養蜂ヨーロッパ腐蛆病 Melissococcus plutonius

项目摘要

ヨーロッパ腐蛆病は蜂群の崩壊につながるミツバチ幼虫の致死性伝染病で、家畜伝染病予防法で法定伝染病に指定されている。原因菌であるMelissococcus plutoniusは、約100年前からその存在が知られているものの、本病の発病機構は全く明らかになっていない。本研究では、ヨーロッパ腐蛆病菌の性状や遺伝子を詳細に解析することにより、本病の発病機構を明らかにし、将来的なヨーロッパ腐蛆病の予防法開発に資する情報を得ることを目的とする。これまでの研究の結果、本課題では、下記の成果が得られた。1. ヨーロッパ腐蛆病の実験室内感染実験法を確立し、遺伝子型の異なるM. plutonius株はミツバチ幼虫に対して異なる病原性を示すことを明らかにした。2. M. plutonius株をミツバチ幼虫に感染させ、病理組織学的解析を行った結果、本菌は基本的に囲食膜に囲まれた中腸腔内にとどまっているが、菌由来の何らかの分子が幼虫体内に拡散し、幼虫に悪影響を与えている可能性が示唆された。3. ヨーロッパ腐蛆病発症時の幼虫の反応を理解するため、感染幼虫と非感染幼虫における遺伝子発現パターンをマイクロアレイ解析で比較した結果、両者では遺伝子発現パターンが明らかに異なり、感染させた菌株のタイプによっても幼虫の遺伝子発現パターンに違いが見られた。4. M. plutoniusの遺伝子欠失株作出法を確立し、本菌の病原性への関与が疑われたエンハンシン遺伝子、ソーテース遺伝子、キチン結合タンパク質遺伝子の欠失変異株の作出した。これら変異株を使って感染実験を行なった結果、ミツバチ幼虫への明らかな病原性の低下は認められず、これらの遺伝子単独では、本菌の病原性に大きな影響を与えていないことが示唆された。

欧洲马格特疾病是蜜蜂幼虫的致命流行，导致蜜蜂菌落的崩溃，并根据《牲畜预防性传染病法》指定为法定流行病。尽管众所周知，plut菌的病毒细菌已经存在了大约100年，但该疾病发作的机理尚未得到揭示。这项研究旨在通过详细分析欧洲马格特腐烂细菌的特性和基因来阐明该疾病的机制和欧洲Maggot腐烂细菌的发展，并获得将有助于开发欧洲Maggot Rot的未来预防方法的信息。在该主题中已经获得了先前研究的结果：1。我们建立了一种实验性的欧洲MAGGOT疾病感染的实验方法，并揭示了具有不同基因型的Plutonius菌株在蜜蜂幼虫中表现出不同的致病性。 2。plutonius菌的菌株被蜜蜂幼虫感染，组织病理学分析表明，尽管这种细菌基本上保留在被包围膜包围的中肠腔内，但一些源自细菌的分子可能会扩散到幼虫中，从而对幼虫产生负面影响。 3。为了了解欧洲玛格特疾病发作时幼虫的反应，我们使用微阵列分析比较了感染和未感染幼虫中的基因表达模式，而幼虫的基因表达模式在感染菌株的类型中显然有所不同。 4。我们建立了一种生成plutonius的基因缺失菌株的方法，并创建了增强蛋白基因的缺失突变体，排序基因和几丁质结合蛋白基因，这些基因被怀疑与细菌的致病性有关。使用这些突变体的感染实验显示，致病性对蜜蜂幼虫没有明显降低，这表明仅这些基因对细菌的致病性没有重大影响。