Analysis of the role of phosphatidylserine-binding proteins accumulated in dental plaque and their relevance to the onset of periodontitis

分析牙菌斑中积累的磷脂酰丝氨酸结合蛋白的作用及其与牙周炎发病的相关性

基本信息

批准号：
22K09937
负责人：
引頭毅
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Asahi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

歯垢は種々の口腔細菌が凝集して歯頚部などに形成されるバイオフィルムであり、細菌と菌体外多糖などのマトリックス、そして代謝産物などを主体として構成されると考えられている。これは環境中で形成される一般的なバイオフィルムの状況から推測されたためでもあるのだが、しかしながら、歯垢は常に唾液や歯肉溝滲出液中の成分に曝され、また歯肉溝から遊出する好中球など免疫細胞の攻撃も受けている。表面には好中球や上皮細胞の死細胞、食物残渣などが堆積する。このような特殊な環境に曝されたバイオフィルムは歯垢の他に存在しないはずである。これを考慮すると、歯垢は宿主由来の様々な因子の作用から影響を受け、あるいは、様々な因子に影響を与えながら複雑な相互作用の元に形成されていると考えるのが妥当と考えられるが、このような考え方は受け入れられていない。我々は歯垢の生物学的性質を根本から見直すことを念頭に、歯垢に堆積されている可能性がある、ホスファチジルセリン結合タンパク質（PBP）を含む様々な宿主由来因子の存在の証明を試みている。本研究の主な解析方法は、基本的に被験者から歯垢検体を採取し、分子生物学的手法により宿主由来因子を検出するものである。様々な因子を調べる中で明らかになってきたのは、歯垢中にDNAが蓄積されていることである。DNA結合性をもつ唾液成分を解析してみたところ、LL-37と呼ばれる抗菌ペプチドとDNAとが強固に結合し、DNaseからの分解耐性を獲得し、堆積していることが明らかになってきた。さらに、歯垢中にはアミロイド様フィブリルとして堆積している可能性が高い２つの因子の存在も確認されてきている。現在これらの詳細を解析しているところであるが、今後はPBPについても調査しながら、これらの由来や分布、堆積の意義などを調査していく予定である。

斑块是在各种口腔细菌的宫颈区域形成的生物膜，被认为主要由细菌，外多糖和代谢产物的基质组成。这也是因为它是从环境中形成的一般生物膜情况下推断的，但是斑块不断暴露于唾液和牙龈沟散发的成分，也受到免疫细胞的攻击，例如从牙龈沟中迁移的中性粒细胞。中性粒细胞，死亡上皮细胞，食物残基等在表面积聚。暴露于此类特殊环境的生物膜应没有牙菌斑。考虑到这一点，可以合理地假设斑块受到各种宿主衍生因素的影响或由复杂的相互作用形成的影响，从而影响各种因素，但是这种想法不接受。我们试图证明存在多种宿主衍生的因素，包括磷脂酰丝氨酸结合蛋白（PBP），可以沉积在斑块中，并对斑块的生物学特性进行了基本综述。这项研究的主要分析方法基本上是从受试者那里收集斑块标本，并使用分子生物学技术检测宿主衍生的因子。当我们研究各种因素时，已经变得清楚的是DNA在斑块中的积累。在分析具有DNA结合特性的唾液成分时，已经发现称为LL-37和DNA牢固结合的抗菌肽，从而获得了DNase和沉积的降解抗性。此外，还已经确认存在两个因子，这些因素可能会沉积为斑块中的淀粉样蛋白样纤维。我们目前正在分析这些细节，但是将来我们计划调查PBP并研究沉积的起源，分布和意义。