エストロゲン受容体α（ERα）によるがん幹細胞サイズを制御する分子機序の解明

阐明雌激素受体α（ERα）控制癌症干细胞大小的分子机制

• 批准号: 22K09650
• 负责人: 李 忠連
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tokyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09650/
• 关键词: Estrogen receptor alpha; Subcellular localization; Cancer stem cell; Cell-size; Mitochondria; Endometrium; Metastasis; Proliferation; estrogen receptor alpha; subcellular localization; cell-size; stem-cell; endometrium

本研究は子宮内膜癌細胞において、局在の異なるエストロゲン受容体α（estrogen receptor α, ERα）ががん幹細胞サイズを制御する分子機序の解析を目的としている。研究代表者は、ERαを発現していない子宮内膜癌細胞株（Ishikawa株）にERα強制発現ベクターを恒久的に導入することによって、①細胞膜（細胞膜型ERα）、②細胞質と細胞核（細胞質核型ERα）、③細胞核（細胞核型ERα）、④EREに結合しない細胞膜・質・核（近野生型ERα）、およびEREに結合する細胞膜・質・核（野生型ERα）に、それぞれERαを発現する細胞株を作成した。当該年度は、細胞質核型ERαを持つ細胞株における、エストロゲン(E2)および、選択的エストロゲン受容体モジュレーターであるタモキシフェン（Tam）、フルベストラント（Fulvestrant or ICI）、あるいはバゼドキシフェン（BDF）を添加し、細胞の増殖能、遊走能ならびに各種シグナルパスウェイ上のタンパク質の発現量およびリン酸化レベルについて解析を行った。細胞質核型ERα細胞では、E2添加により細胞の増殖能と遊走能は亢進し、逆にTamならびにBDF添加により細胞の増殖能が抑制されることが確認された。しかし、ICI添加によるこれらの変化は認められなかった。一方、ERα-細胞において、E2やICIまたBDF添加によるこれらの変化は認められなかった。さらに、増殖能および遊走能に関わるシグナルパスウェイ上のタンパク質の発現量およびリン酸化レベルをウエスタンブロット法によって解析した。細胞質核型ERα細胞とERα-細胞において、非リン酸化mTORの発現量に変化は見られなかった。しかし、細胞質核型ERα細胞においてE2添加により、リン酸化mTOR（Ser2448）の発現量の増加や、リン酸化FAK（Try297）の発現量の低下が認められた。以上の結果より、細胞質と核内に局在するERαを介したリン酸化ｍTORの発現量の増加が、細胞の増殖と遊走の亢進に関与すると考えられる。

本研究的目的是分析不同定位的雌激素受体α（ERα）控制子宫内膜癌细胞中癌症干细胞大小的分子机制。通过将 ERα 强制表达载体永久导入不表达 ERα 的子宫内膜癌细胞系（石川株）中，主要研究者旨在改善 E 型Rα)、3) 在细胞核中表达 ERα 的细胞（细胞核型 ERα）、4) 不与 ERE 结合的细胞膜、血浆和细胞核（接近野生型 ERα），以及在细胞膜中表达 ERα 的细胞、血浆和细胞核与 ERE（野生型 ERα）结合。今年，我们在具有细胞质核型ERα的细胞系中添加雌激素（E2）和选择性雌激素受体调节剂他莫昔芬（Tam）、氟维司群（ICI）或巴多昔芬（BDF），我们分析了细胞增殖能力、迁移能力和表达。以及各种信号通路上蛋白质的磷酸化水平。在细胞质核型ERα细胞中，证实添加E2增强细胞增殖和迁移能力，相反，添加Tam和BDF抑制细胞增殖能力。然而，没有观察到由于 ICI 添加而导致的这些变化。另一方面，由于添加了 E2、ICI 或 BDF，在 ERα 细胞中没有观察到这些变化。此外，通过Western blotting分析与增殖和迁移能力相关的信号通路蛋白的表达水平和磷酸化水平。在细胞质核型ERα细胞和ERα-细胞中未观察到非磷酸化mTOR表达水平的变化。然而，在细胞质核型ERα细胞中，添加E2会增加磷酸化mTOR (Ser2448)的表达水平并降低磷酸化FAK (Try297)的表达水平。由以上结果认为，定位于细胞质和细胞核的ERα介导的磷酸化mTOR表达水平的增加与细胞增殖和迁移的增强有关。

项目成果

Dopamine dynamics in amygdala with emotional changes at early stage of systemic inflammation in rat

大鼠全身炎症早期杏仁核多巴胺动态与情绪变化

• 发表时间: 2023
• 作者: 矢倉 富子;市川 崇;押淵 英弘;李忠連;河田 晋一;永堀 健太;伊藤 正裕;内藤 宗和
• 通讯作者: 内藤 宗和

HSPA4LとGIT1は精巣自己免疫の活性を検出するバイオマーカーとなり得る

HSPA4L和GIT1可以作为检测睾丸自身免疫活性的生物标志物

• 发表时间: 2022
• 作者: 永堀健太;倉升三幸;表原拓也;李 忠連;小川夕輝;伊藤正裕
• 通讯作者: 伊藤正裕

Expression of neurotransmitters, vasculogenesis markers and myosin heavy chain isoforms in the masseter muscle of senescence‐accelerated mouse prone 8 mice

衰老加速小鼠俯卧8只小鼠咬肌中神经递质、血管生成标记物和肌球蛋白重链亚型的表达

• DOI: 10.1111/joor.13449
• 发表时间: 2023
• 期刊: Journal of Oral Rehabilitation
• 影响因子: 2.9
• 作者: Nakamura Chiaki;Sato Iwao;Ueda Yoko;Kawata Shinichi;Nagahori Kenta;Omotehara Takuya;Yakura Tomiko;Natsuyama Yutaro;Li Zhong‐Lian;Itoh Masahiro
• 通讯作者: Itoh Masahiro