ヒトゲノム内在性ウイルス配列によるX精子運動能制御の解明

阐明人类基因组内源病毒序列对 X 精子运动的控制

• 批准号: 22K09474
• 负责人: 林 哲太郎
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09474/
• 关键词: 内在性ウイルス配列; TLR7/8; レトロトランスポゾン; 精子運動能

ヒトゲノムの約8％は「内在性ウイルス配列」で占められており、生物は感染したウイルス遺伝子をゲノムに組み込むことで進化してきたと考えられる。一方で、「内在性ウイルス配列」の生体内での機能はほとんど解っていない。哺乳類の性別は、X染色体とY染色体によって決定され、受精時に卵とX染色体をもつ精子(X精子)が受精することで雌(XX)に、Y染色体をもつ精子(Y精子)と受精することで雄(XY)となる。TLR7/8はRNAウイルスの受容体で、X精子に発現しY精子で発現が無く、精子の運動能に関与する。私たちは、TLR7/8がウイルスを感知することでX精子の運動能が低下することを利用して、ウイルス配列のX精子への作用を調べ、「内在性ウイルス配列」の生殖能への影響を解明することを目的としている。精子の培養と運動能の評価を行うとともに、TLR7/8のアゴニストであるR848と、TLR7単独のアゴニストであるR837を用いた実験を行なった。条件設定として腎癌細胞株Caki-1, caki-2でR848とR837のアゴニストとしての効果をリン酸化NFkBやリン酸化GSK3a/bの発現変化で評価した。精巣腫瘍や前立腺癌での精巣摘除術の精巣標本を用い、精巣内の精母細胞から精子まで免疫組織科学的検討を施行した。ボランティア並びに精液検査検体を用いた蛍光免疫染色での精子のTLR7/8の発現とその局在を評価できる状態となっている。

大约8％的人类基因组被“内部病毒序列”占据，人们认为生物通过将感染的病毒基因掺入基因组中而发展。另一方面，几乎不了解生命体内“内部病毒序列”的功能。哺乳动物的性别由X染色体和Y染色体确定，精子（XX）用鸡蛋和X染色体（XX）用精子（xx）和Y染色体（Y精子）（Y精子）（Y精子）（Y精子）（Y） ）。 TLR7/8是在X精子中表达的RNA病毒的受体，并未由Y精子表达，并且参与了精子运动能力。我们使用TLR7/8来降低X植物运动的能力，以研究病毒序列对X精子的影响以及“内部病毒序列”的生育能力。除了评估精子培养和运动能力外，还使用R848，TLR7/8的激动剂和TLR7独奏激动剂R837进行了实验。作为条件设置，R848和R837激动剂在肾脏癌细胞库存CAKI-1中的作用是通过NFKB和磷酸磷酸盐GSK3A/b的表达的变化来评估CAKI-2的。使用睾丸肿瘤和前列腺癌中的睾丸检测标本，从睾丸中的精子细胞到精子进行了免疫组织科学研究。可以评估使用志愿者和精液测试标本在荧光免疫中精子中精子的表达及其定位。