膀胱がん微小環境におけるPLD1/2によるイムノメタボリズムの制御機構の解明

阐明膀胱癌微环境中PLD1/2免疫代谢的控制机制

基本信息

批准号：
22K09466
负责人：
神鳥周也
金额：
$ 2.66万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

膀胱がん微小環境ががんの進展や治療奏効性に影響を及ぼす重要な因子であり、がん免疫療法に対する抵抗性獲得に寄与することが明らかとなってきた。本研究で着目するホスホリパーゼD（PLD）はホスファチジルコリンを加水分解して、ホスファチジン酸（PA）を産生するリン脂質代謝酵素であり、PAは脂質性シグナル伝達分子として多彩な生理機能を有している。このような加水分解活性を有する哺乳類PLDとして、PLD1とPLD2の2つのアイソザイムが存在する。これまでにPLDはがん細胞の増殖や浸潤を促進することが報告されているが、がん免疫微小環境における役割は未だ十分に解明されていない。予備実験としてPLD1/PLD2-KOマウスにおけるBBN膀胱発がん実験を行った。興味深いことに、PLD1-KOマウスでは発がんが抑制され、PLD2-KOマウスでは促進された。この結果から、膀胱がんにおいてPLD1とPLD2のがん免疫微小環境における役割が異なることが示唆された。そこで、PLDによるイムノメタボリズムに基づく、がん免疫微小環境への影響を明らかにし、新たながん複合免疫療法の開発への基盤を構築することを目的とした。マウス膀胱がん細胞株MB49による皮下移植モデルにおいても同様にPLD2-KOマウスでは腫瘍形成が促進された。BBN膀胱発がんモデルにおける腫瘍組織を用いてRNAシークエンスを実施した。パスウェイ解析では、PLD2-KOマウスではMSP-RON Signaling in Macrophages Pathway、S100 Family Signaling Pathwayが亢進しており、その発がん過程において腫瘍関連マクロファージ（TAM）や骨髄由来抑制細胞（MDSC）が関与している可能性が示唆された。皮下移植モデルにおける腫瘍組織では、PLD2-KOによりFACSでTAMの増加を認めた。

现已明确，膀胱癌微环境是影响癌症进展和治疗效果的重要因素，并有助于获得对癌症免疫治疗的耐药性。本研究的重点磷脂酶D（PLD）是一种磷脂代谢酶，可水解磷脂酰胆碱产生磷脂酸（PA），而PA作为脂质信号分子具有多种生理功能。作为具有这种水解活性的哺乳动物PLD，有两种同工酶PLD1和PLD2。尽管PLD已被报道可促进癌细胞增殖和侵袭，但其在癌症免疫微环境中的作用尚未完全阐明。作为初步实验，我们在 PLD1/PLD2-KO 小鼠中进行了 BBN 膀胱癌发生实验。有趣的是，PLD1-KO 小鼠的致癌作用受到抑制，而 PLD2-KO 小鼠的致癌作用则得到促进。这些结果表明PLD1和PLD2在膀胱癌的癌症免疫微环境中具有不同的作用。因此，我们的目的是基于免疫代谢阐明PLD对癌症免疫微环境的影响，并为开发新的联合癌症免疫疗法奠定基础。在使用小鼠膀胱癌细胞系MB49的皮下植入模型中，PLD2-KO小鼠的肿瘤形成同样得到促进。使用 BBN 膀胱癌发生模型中的肿瘤组织进行 RNA 测序。通路分析显示巨噬细胞通路中的MSP-RON信号通路和S100家族信号通路在PLD2-KO小鼠中增强，肿瘤相关巨噬细胞（TAM）和髓源性抑制细胞（MDSC）参与癌变过程的可能性。被建议。在皮下植入模型的肿瘤组织中，通过FACS观察到由于PLD2-KO导致TAM增加。