免疫細胞の加齢による腫瘍微小環境の変化とその制御による膠芽腫治療法の開発

免疫细胞老化引起的肿瘤微环境变化以及通过其控制开发胶质母细胞瘤治疗

基本信息

批准号：
22K09261
负责人：
八幡俊男
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kochi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09261/
关键词：
膠芽腫加齢脳腫瘍腫瘍微小環境

项目摘要

原発性脳腫瘍のうち悪性度の最も高い膠芽腫は、放射線治療や化学療法に対して強い抵抗性を示し、免疫メカニズムからも逃避している。この腫瘍を根絶させるためには、周辺免疫細胞を含む腫瘍微小環境を制御する革新的な治療法の開発が必要である。本研究は、腫瘍随伴マクロファージ（TAM: tumor-associated macrophage)とミクログリアの加齢が、膠芽腫の腫瘍微少環境やがん幹細胞へ与える影響を解明し、その影響を制御することによって膠芽腫の治療効果を向上させることを目的とする。今年度は、マウス脳腫瘍モデルを用いて、脳の加齢の造腫瘍性やその微小環境に対する影響を解析する系の確立を進めた。生体内イメージングと脳組織の解析を効率化するためにルシフェリンを基質として発光するルシフェラーゼ遺伝子と蛍光タンパクであるmCherry遺伝子をコードしたレンチウイルスベクターを構築し、マウス神経膠腫細胞GL261とヒト膠芽腫幹細胞3株に遺伝子導入後、細胞株を樹立した。樹立したGL261(GL261-luc/mCherry)細胞を同系マウスであるC57BL/6の脳内または皮下に移植し、造腫の増殖を生体内イメージングにより経時的に観察し、約4-5週後には組織学的解析により腫瘍組織を解析し、腫瘍の生着が確認出来た。また、より強い造腫瘍性と実際の腫瘍組織像や病態像に近いモデルの構築を目指して、このGL261細胞をスフェア培養し、幹細胞を多く含む培養細胞を分離した。この系を用いて若年マウスと老齢マウスにおける腫瘍組織の形成過程や腫瘍周辺組織の差異を解析する予定である。

在原发性脑肿瘤中，胶质母细胞瘤（最高等级）对放射线和化学疗法具有高度抗性，并且还逃脱了免疫机制。根除该肿瘤需要开发控制肿瘤微环境（包括周围免疫细胞）的创新疗法。这项研究旨在阐明副型巨噬细胞（TAM）和小胶质细胞对胶质母细胞瘤的肿瘤微环境和癌症干细胞的衰老影响，并通过控制效果来改善胶质母细胞瘤的治疗作用。今年，我们一直在建立一个使用小鼠脑肿瘤模型来分析大脑肿瘤及其对微环境的影响的系统。为了提高体内成像和脑组织分析的效率，构建了编码荧光素酶基因的慢病毒载体，该基因构建了荧光素基因，构建了荧光素的荧光素基因，构建了荧光蛋白，并在基因转移到小鼠胶质瘤细胞中GL261和三个人类胶质细胞细胞，建立了基因后，建立了细胞细胞系。将已建立的GL261（GL261-LUC/MCHERRY）细胞植入大脑或皮下的合成小鼠C57BL/6，并通过体内成像随时间观察到肿瘤的生长，在4-5周之后，通过组织学分析，组织学分析，肿瘤学分析了肿瘤组织。此外，为了创建一个更接近更强烈的肿瘤性和实际肿瘤组织学和病理图像的模型，GL261细胞是培养的，并分离了含有许多干细胞的培养细胞。该系统将用于分析肿瘤组织的形成过程以及年轻小鼠和老年小鼠的肿瘤组织之间的差异。