抗炎症タンパク質HRGに着眼した肺虚血再灌流障害に対する新規治療法の開発

以抗炎蛋白HRG为核心开发肺缺血再灌注损伤治疗新方法

基本信息

批准号：
22K08974
负责人：
杉本誠一郎
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

肺移植後の虚血再灌流障害は早期移植肺機能不全の主因であり、急性拒絶反応や慢性移植肺機能不全の発症や、肺移植後生存率が低下する要因となる。肺移植後の予後を改善するためには虚血再灌流障害の制御がキーとなるが、虚血再灌流障害にはHigh-mobility group box 1(HMGB1)などの様々な炎症性サイトカインが関与する。本研究では、HMGB1を介した炎症反応を抑制する、高ヒスチジン糖タンパク質(Histidine-rich glycoprotein, HRG)に着目した。HRGは凝固、線溶、炎症の調節等に関与する多機能性の血漿糖タンパク質である。申請者は、肺移植患者の血液検体を用いて、肺移植後72時間における高度の早期移植肺機能不全症例では血漿HRGが低下しており、HRGの低下が将来的な慢性移植肺機能不全の発症や全生存率の低下に関連するという知見を得た。本研究では、マウス肺門クランプモデルを用いて、肺の虚血再灌流障害に対するHRG補充療法の治療効果を検討している。まず、予備実験を行い、肺移植患者と同様に、マウスの肺虚血再灌流障害でも血中HRGの発現が低下することを確認した。次に、HRGの治療効果を評価するために最適な虚血時間や評価のタイミングを含めた実験モデルを確立した。その後、マウスを偽手術群と虚血再灌流障害群に分け、更に虚血再灌流障害群をコントロールとしてPBSを投与するPBS群、ヒト血清アルブミン（HSA）を投与するHSA群、HRGを投与するHRG群の4群に分け、4群間で動脈血液ガス、組織学的肺障害スコア、好中球浸潤、アポトーシス、炎症性メディエーターの発現などの評価を行っている。

肺移植后缺血再灌注损伤是早期移植肺功能障碍的主要原因，也是导致急性排斥反应和慢性移植肺功能障碍以及肺移植后生存率下降的因素。控制缺血再灌注损伤是改善肺移植术后预后的关键，高迁移率族蛋白1（HMGB1）等多种炎症细胞因子参与缺血再灌注损伤。在这项研究中，我们关注富含组氨酸的糖蛋白 (HRG)，它抑制 HMGB1 介导的炎症反应。 HRG 是一种多功能血浆糖蛋白，参与凝血、纤溶和炎症调节。使用来自肺移植患者的血液样本，申请人发现在肺移植后72小时患有严重早期移植肺功能障碍的患者中血浆HRG降低，并且HRG降低可能导致未来慢性移植肺功能障碍的降低。发病率和总生存率。在本研究中，我们使用小鼠肺门钳模型研究了 HRG 替代疗法对肺缺血再灌注损伤的治疗效果。首先，我们进行了初步实验，证实小鼠肺缺血再灌注损伤时血液中HRG的表达降低，与肺移植患者的情况相似。接下来，我们建立了一个实验模型，包括最佳缺血时间和评估时机来评估 HRG 的治疗效果。此后，将小鼠分为假手术组和缺血再灌注损伤组，以缺血再灌注损伤组为对照，给予PBS，HSA组给予人血清白蛋白(HSA)，给予HRG的HSA组将患者分为四个HRG组，对四组之间进行动脉血气、组织学肺损伤评分、中性粒细胞浸润、细胞凋亡和炎症介质表达的评估。