制御性T細胞のmPGES-1/PGE2/EP受容体による虚血改善メカニズムの解析

调节性T细胞mPGES-1/PGE2/EP受体改善缺血机制分析

• 批准号: 22K08942
• 负责人: 天野 英樹
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08942/
• 关键词: 制御性T細胞; 血管新生; 虚血改善効果; 免疫細胞; Rag2KO; mPGES-1; PGE2; EP4; Tres; 制御性T細胞; 血管新生; 虚血改善効果; 免疫細胞; Rag2KO; mPGES-1; PGE2; EP4; Tres

本年度はTreg自身が虚血改善効果に関与しているか否かについて検討した。Rag2KOに対し①T細胞を移植後の虚血改善果の違い②Treg細胞又は非Treg細胞を移植後に虚血改善効果の違いの2つを検討することにした。1.T細胞の虚血改善効果の検討(天野英樹,江島耕二)：虚血改善にT細胞が関与しているか検討するためにWT由来の脾臓細胞をRag2KOに移植後右大腿動脈を露出し,結紮・切離し下肢虚血モデルの作成を行なった。2.下肢の虚血改善効果の評価 (天野英樹)：①右下肢の虚血改善効果：虚血改善効果は 下肢血流比＝右下肢血流量/左下肢血流量で行なった。WT由来の脾臓細胞を投与群は対照群と比較し有意に虚血の改善効果を認めた。3.新生血管の評価：血管内皮特異的マーカーであるCD31に対する免疫組織化学を行った。CD31陽性の細胞数をNIH imageソフトを用いて算出した。WT由来の脾臓細胞を投与群は対照群と比較し有意に虚血筋組織におけるCD31陽性細胞数の増加を認めた。4.WT由来のTregの虚血改善効果の検討(天野英樹, 江島耕二)WTの胸腺組織からセルソータを用いてTreg細胞(CD4+CD25+)と非Treg細胞(CD4+CD25-)を抽出した。Rag2KOにこれらの細胞を移植後,モデル作成し経時的に左右の下肢血流比を測定を行なった。Rag2KOにWT胸腺由来のTreg細胞(CD4+CD25+)移植群は非Treg細胞(CD4+CD25-)移植群と比較し有意に虚血の改善効果を認めた。さらに虚血筋組織におけるCD31陽性細胞数もTreg細胞(CD4+CD25+)移植群は非Treg細胞(CD4+CD25-)移植群と比較し有意に増加を認めた。以上の結果から虚血部位にし移籍したTregのmPGES-1/PGE2経路が虚血の改善に深く関与していることが推測された。

今年，我们检查了Treg本人是否参与缺血改善效果。我们已决定研究对rag2ko移植T细胞后改善缺血的作用的两个差异：1）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2 ）2作 2页中2）2）2 ）2作中2作本其中已2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2）2 1页2 1页中2 1页2年2）2 1 1页2 1页1。将WT衍生的脾细胞植入RAG2KO中，并暴露了右股动脉，并进行了结扎和解剖以创建下肢缺血模型。 2。评估下肢（Amano hideki）改善缺血的影响：1。右下肢改善缺血的影响：使用下肢血流比=右下肢血液流量进行改善缺血的作用。与对照组相比，用WT衍生的脾细胞处理的组显示出改善缺血的显着作用。 3。新血管化评估：在血管内皮特异性标记CD31上进行免疫组织化学。使用NIH图像软件计算CD31阳性细胞的数量。与对照组相比，用WT衍生的脾细胞处理的组在缺血性肌肉组织中的CD31阳性细胞数量显着增加。 4。研究从WT中提取的Treg（Amano Hideki，Ejima Koji）Treg细胞（CD4+CD25+）和非Treg细胞（CD4+CD25-）的效果。将这些细胞植入RAG2KO后，对细胞进行建模，并随时间测量左下肢的血流比。与移植的非Treg细胞（CD4+CD25-）相比，从WT胸腺移植到RAG2KO中的Treg细胞（CD4+CD25+）显示出显着改善的缺血。此外，与非Treg细胞（CD4+CD25-）移植组相比，在Treg细胞（CD4+CD25+）移植组中，缺血性肌肉组织中CD31阳性细胞的数量显着增加。从上述结果中可以推测，Treg的MPGES-1/PGE2途径转移到缺血部位并转移了，与改善缺血有关。