CA9を標的とした膵癌の予後予測と個別化新規治療戦略の開発

胰腺癌预后预测及针对CA9的新型个性化治疗策略的开发

基本信息

批准号：
22K08854
负责人：
寺井太一
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Nara Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

低酸素環境は腫瘍の悪性化に関わり，有望な環境標的治療の対象となりうる．Carbonic Anhydrase 9（CA9）は低酸素環境で癌細胞に発現する膜貫通蛋白であり，固形癌において腫瘍の局所進展や転移に関わっていると報告されているが化学放射線治療との関連について報告されていない．今回我々は膵癌においてCA9と化学放射線治療に着目し，統合的を行った.In vitro実験としてBxPC-3細胞株，Panc-1細胞株を用いて，低酸素培養（1%02），放射線照射（2Gy×5day），放射線照射＋ゲムシタビン（0.1nM）投与を行い，CA9の発現をRT-PCR，FACSで比較し，さらにSiRNAを用いてCA9を阻害し，増殖アッセイを行った．低酸素培養を行うとCA9の発現は有意に上昇したが，BxPC-3,Panc-1共に放射線照射，放射線照射+ゲムシタビン投与でCA9の発現はRNA，タンパク質共に低下していた．増殖アッセイでは放射線照射，CA9阻害，CA9阻害+放射線照射，CA9阻害+放射線照射+ゲムシタビンに差は認めず，治療を何も加えていないNaiveなものが有意に細胞増殖を認めた．また，Apoptosis解析においてCA9発現が各種の治療におけるApoptpsis促進性に関与していることがわかった．化学放射線治療により，CA9が低下することが，膵癌患者の予後延長に寄与している可能性があり，治療選択に応用できる可能性があると考えるがさらなる検証を行うため，今後Liquid biopsyやIn vivo実験を行い，CA9の機能解析や測定の臨床での意義をさらに検証していく．

低氧环境与肿瘤恶性肿瘤相关，可能是环境靶向治疗的一个有希望的目标。碳酸酐酶9（CA9）是一种在缺氧环境下的癌细胞中表达的跨膜蛋白，据报道参与实体癌的局部肿瘤进展和转移，但尚未有与放化疗相关的报道。在这项研究中，我们重点关注 CA9 和胰腺癌的放化疗，并进行了综合治疗。使用BxPC-3细胞系和Panc-1细胞系进行体外实验，采用低氧培养（1%02）、放射线照射（2Gy x 5天）、放射线+吉西他滨（0.1nM）给药，并比较CA9的表达。使用RT-PCR和FACS获得结果，然后使用SiRNA抑制CA9并进行增殖测定。低氧培养时CA9的表达显着增加，但照射BxPC-3和Panc-1后以及给予照射+吉西他滨时，RNA和蛋白质的CA9表达均下降。在增殖测定中，放射线照射、CA9抑制、CA9抑制+放射线和CA9抑制+放射线+吉西他滨之间没有观察到差异，并且在未经任何处理的初始细胞中观察到显着的细胞增殖。此外，细胞凋亡分析表明CA9表达在各种治疗中参与促进细胞凋亡。我们认为放化疗降低CA9可能有助于延长胰腺癌患者的预后，并且可能适用于治疗选择，我们将进行体内实验以进一步验证CA9功能分析和测量的临床意义。