低分子化合物によるリプログラミング技術を用いた自己非β膵細胞からの新規β細胞誘導

使用低分子量化合物的重编程技术从自体非 β 胰腺细胞诱导新型 β 细胞

• 批准号: 22K08717
• 负责人: 足立 智彦
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08717/
• 关键词: 低分子化合物; 膵外分泌細胞; 膵頭移植

当科ではこれまでにCLiP (Chemicaly induced liver progenitor cell)を用いた検討で、成熟肝細胞への低分子化合物添加にて前駆細胞への若返り、およびそこからの肝細胞あるいは胆道系細胞への誘導を確立している。これを膵臓にあてはめれば、1型糖尿病患者の膵臓には、β細胞は枯渇しているものの、その他のホルモン分泌細胞であるα・δ細胞や膵外分泌細胞あるいは膵管上皮細胞は問題なく存在することから、肝臓の成熟肝細胞でのCLiP同様に、成熟膵細胞を用いて前駆細胞へのリプログラミング(Chemically-induced Pancreas Progenitor（CPaP）)およびβ細胞への誘導ができる可能性が高い。患者の尾側膵切除を行い、そこから分離された腺房/膵管上皮から前駆細胞に戻したうえでのβ細胞誘導、自家移植が可能ではとの考えに至った。本年は小動物膵臓を用いたin vitro実験を施行。STZ200mgを腹腔内投与し,１型DMマウスを作製。随時血糖値＞350mg以上を基準とした。これらのマウスの膵臓を摘出し、組織を消化・分離し、播種、各種少分子化合物添加培地でDAY7まで浮遊培養を行い、最終的に、DAY0.2.7でRNA抽出を行った。低分子化合物として、YACと5-AZAを用いて検討をまず行ったが、PDX1/NGN3発現ともに一定の方向性を現状では見いだせていない。あるいは、5-AZAを用いて、他のSOX9/ Ptf1a/ nkx2.2/ Nuerd1等の前駆細胞マーカーも検討しているが、やはり現状では前駆細胞化等は認めていない。並行して、カナダ：アルバータ大学から提供されたヒト外分泌細胞を用いて同様の検討を行っている。

我们的部门先前曾使用夹子（化学诱导的肝脏祖细胞）研究，以建立祖细胞将祖细胞恢复到前体细胞中，并将其诱导到肝细胞或胆道细胞。如果将其应用于胰腺，尽管在1型糖尿病患者的胰腺中耗尽了β细胞，其他激素的细胞，α-δ细胞，外分泌胰腺细胞，胰腺导管或胰腺导管上皮细胞存在任何问题，因此可能会导致成熟的细胞和分数（Cpp），因此，胰腺导管的上皮细胞存在，因此它可能会逐渐变细胞。肝脏中成熟的肝细胞夹子。该患者是尾骨胰腺切除术，患者从孤立的腺泡/胰管导管上皮返回祖细胞，并且可以将β细胞诱导和自体移植的想法。今年，我们使用小动物胰腺进行了一项体外实验。 1型DM小鼠是通过腹膜内施用STZ200mg制备的。血糖水平> 350 mg或更高始终是标准。将这些小鼠的胰腺去除，消化和分离，播种，并悬浮在培养基中添加了各种小分子化合物，直到第7天，最后用第0.2.7天提取RNA。尽管使用YAC和5-AZA作为小分子化合物进行了研究，但对于PDX1/NGN3表达，尚未发现特定方向。另外，已经使用5-Aza研究了其他祖细胞标记，例如SOX9/PTF1A/NKX2.2/NUERD1，但目前尚未观察到前体细胞的形成。同时，使用加拿大艾伯塔大学提供的人类外分泌细胞也进行了类似的研究。