糖質コルチコイドによるRNAメチル化を介したT細胞制御の解明

阐明糖皮质激素 RNA 甲基化介导的 T 细胞调节

基本信息

批准号：
22K08654
负责人：
福岡秀規
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08654/
关键词：
グルココルチコイド m6A RNAメチル化 ACTH T細胞

项目摘要

糖質コルチコイド（GC）は強力な抗炎症作用、免疫抑制作用を持ち、生体におけるストレス応答を担っている。GC分泌を調節している副腎皮質刺激ホルモン（Adrenocorticotropic hormone: ACTH）は下垂体から分泌され、GCによるネガティブフィードバック機構を呈し、その過剰分泌を抑制する機構として作用している。近年、ストレス刺激により脳内のm6A調節がGCにより異常を呈する事が示された。m6Aは転写後修飾として最も豊富に存在するRNA修飾である。生理学的にも発生や概日リズムに重要な役割を担っており、m6Aの調節異常は多彩な病態と関わっている事が明らかとなってきた。m6A修飾の調整酵素としてWriter（メチル化酵素）、Eraser（脱メチル化酵素）が存在する。本研究ではまずこれらの調節酵素によるACTH分泌調節について検討を行った。ACTH分泌調節を検討するモデルとしてマウス由来ACTH分泌細胞株を用いてGC投与を行ったところ、ACTH前駆体であるproopiomelanocortin (POMC)の発現がm6A調節酵素に与える影響について検討したところMettl3, FTOの抑制を認めた。次にAtT20細胞においてFTOノックダウンを行ったところ、POMCは40％低下した。さらにこれがm6Aを介しているかを明らかにするためFTOにおけるm6A脱メチル化活性の特異的阻害剤であるFB23-2を用いて検討を行ったところ、同様にPOMC発現を低下させた。次にメチル化酵素であるMettl3について同様の検討を行ったところ、POMC発現はやはり50%の低下を認めた。これらを含め、現在Mettl3とFTOがPOMCのmRNAに対して、それぞれ異なった転写因子のm6A調節を介してPOMC発現を調整していると考え、検討を重ねている。

糖皮质激素 (GC) 具有强大的抗炎和免疫抑制作用，并负责生物体的应激反应。促肾上腺皮质激素（ACTH）由垂体分泌，调节GC的分泌，并通过GC表现出负反馈机制，起到抑制其过度分泌的机制。近年来研究表明，应激刺激会导致GC对大脑中m6A的调节异常。 m6A 是最丰富的转录后 RNA 修饰。从生理学角度来看，它在发育和昼夜节律中发挥着重要作用，并且已经明确 m6A 的失调与多种病理状况有关。 Writer（甲基转移酶）和 Eraser（去甲基酶）作为 m6A 修饰的调节酶而存在。在本研究中，我们首先研究了这些调节酶对 ACTH 分泌的调节。作为检查 ACTH 分泌调节的模型，我们使用小鼠来源的 ACTH 分泌细胞系进行 GC 给药，研究了 ACTH 前体阿黑皮素原 (POMC) 的表达对 m6A 调节酶的影响。接下来，当我们在 AtT20 细胞中进行 FTO 敲除时，POMC 下降了 40%。此外，为了澄清这是否是由 m6A 介导的，我们使用 FB23-2（FTO 中 m6A 去甲基化活性的特异性抑制剂）进行了研究，它同样降低了 POMC 的表达。接下来，当我们对甲基转移酶Mettl3进行类似的研究时，我们也观察到POMC表达量下降了50%。包括这些，我们目前正在考虑Mettl3和FTO通过调节不同的转录因子m6A来调节POMC mRNA上的POMC表达。