シングルセル解析によるB型肝炎持続感染に関わる新規宿主因子の同定および創薬研究

利用单细胞分析鉴定与持续性乙型肝炎感染相关的新型宿主因素和药物发现研究

基本信息

批准号：
22K08579
负责人：
靭千恵
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

B型肝炎ウイルス(HBV)の持続感染は肝がんの発生リスクとなっているが、現在の慢性B型肝炎に対する治療法ではHBVの完全排除は困難な状況である。そこで、本研究は、B型肝炎の持続感染に重要な新規宿主遺伝子を同定しその機能を明らかにするとともに、インドネシア薬用植物含む天然物資源からcccDNAを標的とした新規抗HBV物質を同定することを目的とする。初年度は、HBV持続感染を再現する培養細胞モデルの確立として、まずHuh7細胞にNTCP分子を発現するHuh7-NTCP細胞(8種)を樹立した。また、Huh7細胞を、AB型正常ヒト血清を最終2%になるように添加した培地で培養を行うと、約2週間で細胞増殖が停止し、その後も死滅せずに維持されることを確認した。この細胞増殖が停止したHuh7細胞が、肝細胞に近い代謝活性を維持するのかどうか、HBV感染性や持続感染能と合わせて検証している。持続感染実験の新たな細胞モデルを確立できれば、病態解明や治療薬の開発に有用となる。

尽管肝炎病毒（HBV）持续感染有肝癌的风险，但目前对慢性乙型肝炎的治疗很难完全消除HBV。因此，这项研究旨在确定对乙型肝炎持续感染至关重要的新型宿主基因，并阐明其功能，并鉴定出针对自然产品资源（包括印度尼西亚药用植物）的CCCDNA的新型抗HBV物质。在第一年，为了建立一个培养的细胞模型，该模型再现了持续的HBV感染，首先在HUH7细胞中建立了表达NTCP分子的HUH7-NTCP细胞（8种）。此外，当将HuH7细胞在补充AB正常血清的培养基中培养到最终的2％时，可以证实细胞增殖在大约2周后停止，并保持不变。我们已经验证了已经停止细胞增殖的HuH7细胞是否与HBV感染性和持续感染性保持了与肝细胞相似的代谢活性。如果可以建立用于连续感染实验的新细胞模型，则将对阐明病理状况和开发治疗药物有用。

项目成果

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专利数量（0）

Amentoflavone inhibits hepatitis B virus infection via the suppression of preS1 binding to host cells

DOI：
10.1111/1348-0421.13064
发表时间：
2023-03
期刊：
Microbiology and Immunology
影响因子：
2.6
作者：
Chie Aoki-Utsubo;Puguh Indrasetiawan;Kento Fukano;Masami Muramatsu;N. Artanti;M. Hanafi;H. Hotta-
通讯作者：
Chie Aoki-Utsubo;Puguh Indrasetiawan;Kento Fukano;Masami Muramatsu;N. Artanti;M. Hanafi;H. Hotta-

インドネシア科学院化学研究センター(インドネシア)

印度尼西亚科学院化学研究中心（印度尼西亚）