炎症性筋疾患の筋膜におけるCXCL13発現細胞の局在と細胞種の同定

炎症性肌病筋膜中 CXCL13 表达细胞的定位和细胞类型鉴定

基本信息

批准号：
22K08530
负责人：
吉田健
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Jikei University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

16症例［皮膚筋炎10例（抗合成酵素症候群を含む）と多発性筋炎6例（抗合成酵素症候群を含まず）］の筋膜を含んだ筋生検組織を用いてトランスクリプトーム解析行ったが、不適切症例を除き再度、15症例［皮膚筋炎9例（抗合成酵素症候群を含む）と多発性筋炎6例（抗合成酵素症候群を含まず）］でトランスクリプトーム解析を行った。その結果、多発性筋炎の筋膜と比較して皮膚筋炎の筋膜ではCXCL13の発現量は10倍以上と高発現していたが、補正したp-value (FDR p-value)では0.05未満に至らなかった。しかし、同じCXCLケモカインの中でCXCL10が15倍以上と高発現しており、FDR p-valueも0.05未満であったため、まずはCXCL10を解析対象とした。筋膜でCXCL10を高発現している局在と細胞種を同定するためにin situ hybridization (ISH)を行った。その結果、CXCL10は炎症細胞が浸潤している周囲に多く存在する傾向がみられた。また、炎症細胞が浸潤していない部位でも観察される部位がみられた。CXCL10陽性細胞の中で細胞の形態上、紡錘形であるものが存在したため、線維芽細胞をはじめとする間葉系細胞マーカーの1つであるビメンチンとCXCL10の二重染色を行った。その結果、多発性筋炎の筋膜と比較して皮膚筋炎の筋膜ではダブルポジティブの細胞数が有意に多かった。現在、ImageJを用いて、CXCL10やビメンチンの発現量も解析している。

在16例（包括抗合成综合征）和6例多聚肌炎（不包括抗合成综合征）的16例病例中，使用肌肉活检组织进行转录组分析，但15例皮肤质炎（包括抗疾病综合症）是15例[9例（包括抗体性综合症）[9例（包括9例）[9.9例（包括抗体性综合症）[9例（包括抗体性综合症）[9.9例（包括抗体性综合症）[9例（包括抗体性）[9例（包括9例）[9.9例（包括抗合性）[综合征）和6例多聚肌炎（不包括抗合成综合征）]。结果，与多聚肌炎的筋膜相比，皮肤炎筋膜的CXCL13表达水平高于10倍，但是校正后的P值（FDR P值）的表达水平不高于0.05。但是，在同一CXCL趋化因子中，CXCL10的表达高15倍以上，而FDR P值也小于0.05，因此首先分析了CXCL10。进行原位杂交（ISH），以识别筋膜高度表达的细胞类型。结果，发现CXCL10倾向于存在于炎性细胞浸润的周围区域。此外，即使在未渗透炎症细胞的区域也观察到了某些部位。在CXCL10阳性细胞中，在细胞形态中发现了一些纺锤形细胞，因此对波形蛋白（包括成纤维细胞和CXCL10）进行了双染色。结果，与多聚肌炎的筋膜相比，皮肌炎筋膜中双阳性细胞的数量明显更高。当前，我们还使用ImageJ分析了CXCL10和Vimentin的表达水平。