内皮型NO合成酵素制御および血管内皮機能調整における時計遺伝子DEC1の役割

时钟基因DEC1在内皮NO合酶调节及血管内皮功能调节中的作用

• 批准号: 22K08207
• 负责人: 丸橋 達也
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08207/
• 关键词: 血管内皮機能; 時計遺伝子

抑制的時計遺伝子differentiated embryo chondrocyte 1 (Dec1)は、liver kinase B1 (LKB1) のリン酸化を抑制することでadenosine monophosphate-activated protein kinase (AMPK) のリン酸化を抑制することが示唆されている。本研究では、血管内細胞にて、DEC1発現が、LKB1/AMPKを介して、内皮型一酸化窒素合成酵素 （eNOS: endothelial nitric oxide synthase） のリン酸化および、血管内皮機能に及ぼす影響について検討を行っている。6週齢の野生型マウスとDEC1ノックアウトマウスから血管内皮細胞の単離・培養を行い、①大気下野生型マウス内皮細胞、②低酸素下野生型マウス内皮細胞、③大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞、④低酸素下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞において、LKB1、AMPK、eNOSそれぞれのリン酸化/発現について比較検討を行った。②低酸素下野生型マウス内皮細胞にてDEC1の発現が増加することが確認された。③大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞にてeNOSリン酸化が亢進することが確認された。また、③大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞にてLKB1リン酸化およびAMPKリン酸化が亢進することが確認された。現在、AMPKリン酸化阻害薬であるcompound Cにて、③大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞のeNOSリン酸化が抑制されるかどうか確認中である。

已经提出，抑制性时钟基因分化的胚胎软骨细胞1（DEC1）抑制了肝激酶B1（LKB1）的磷酸化，从而抑制了单磷酸腺苷激活的蛋白质激酶（AMPK）的磷酸化。在这项研究中，我们研究了DEC1表达对血管内细胞中LKB1/AMPK内皮一氧化氮合酶（ENOS）的影响，以及内皮一氧化氮合酶对血管血管的磷酸化和内皮功能的影响。分离血管内皮细胞并从6周龄的野生型小鼠和DEC1敲除小鼠中进行培养，并比较1）在大气野生型小鼠内皮细胞中，在1）中比较1）在1）中的野生型小鼠内皮细胞，2）在低氧野生型小鼠内膜内的细胞中，在4）中构成了4）。敲除小鼠内皮细胞。 2）已经证实，在低氧和野生型小鼠内皮细胞中DEC1表达增加。这证实，在大气中DEC1敲除小鼠的内皮细胞中，ENOS磷酸化增加了。此外，在大气中DEC1基因敲除小鼠的内皮细胞中，LKB1磷酸化和AMPK磷酸化增加了。目前，正在检查化合物C是一种AMPK磷酸化抑制剂。