低リスク患者の食道扁平上皮癌の発がん分子機序の解明

阐明低危患者食管鳞癌的致癌分子机制

• 批准号: 22K08003
• 负责人: 後藤 裕樹
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08003/
• 关键词: 細胞老化; SASP; 食道扁平上皮癌; トランスクリプトーム; 表在型食道扁平上皮癌; CDKN2A; エストロゲン; 非飲酒、非喫煙女性

日本を含むアジア諸国では食道癌の80%以上は扁平上皮癌（ESCC）で腺癌が主体の欧米と異なる。男性や喫煙、飲酒、特にアルコール代謝に関連する酵素の遺伝子多型（ALDH2やADH1B）が、ESCCのリスク因子として知られている。しかし、飲酒や喫煙歴のない女性でもESCCの発症は一定の割合でみられる。我々は表在型ESCCの遺伝子解析を行い、低リスクとされる女性の表在型ESCC患者の非癌部上皮でCDKN2A遺伝子バリアント頻度が高いことを報告した。ESCCには高リスクとされる男性や飲酒、喫煙に影響される経路以外に発癌に至る新しい経路が潜在する可能性が示唆される。しかし、これまでのESCCの遺伝子変化の解析の主体は男性の飲酒喫煙者で、この女性の低リスクESCCの発癌機序は不明である。本研究では、低リスクの女性の表在型ESCCに焦点をあて、CDKN2A遺伝子を軸とした遺伝子変化、エストロゲンや細胞老化との関連性を明らかにし、この機序の制御が新しい治療標的となりえるかを明らかにすることを目的とする。2022年度は、内視鏡的食道粘膜下層剥離術にて切除した表在型ESCC組織を用いて細胞老化とその関連性分泌因子（p21とIL-6）の蛋白発現を、免疫染色を用いて検討し、CDKN2A遺伝子バリアントとの関連性を検証した。p21の蛋白発現が特に非飲酒、非喫煙の女性の非癌部で高い傾向があることが明らかとなった。次に早期ESCC組織を傍基底層領域とその上層に顕微鏡下で正確に切り分け、それぞれの組織からRNAを抽出し、RNAシークエンス解析を行った。この網羅的な発現データを、背景のリスク因子（飲酒や喫煙、性差）に分けて比較し、非癌部や癌部の傍基底層領域やその上層での細胞老化やその関連因子をはじめとした特徴的なmRNA発現変化の同定を試みている。

在包括日本在内的亚洲国家中，超过80％的食管癌是鳞状细胞癌（ESCC），它与主要使用腺癌的欧洲和美国不同。与男性和吸烟，饮酒，尤其是酒精代谢相关的酶的遗传多态性（ALDH2和ADH1B）被称为ESCC的危险因素。但是，即使是没有饮酒或吸烟史的妇女也经历了一定的ESCC。我们对浅表ESCC进行了基因分析，并报道CDKN2A基因变异在女性表面ESCC患者的非癌症上皮中更为常见，这被认为是低风险。这表明，除了受酒精和吸烟影响的高风险男人和路线外，ESCC可能会导致癌症的新路线。但是，对ESCC最新的遗传变化的主要分析是雄性酒精饮用的吸烟者，女性低风险ESCC的机制尚不清楚。这项研究的重点是低风险女性的表面ESCC，旨在阐明基于CDKN2A基因的基因变化，雌激素和细胞衰老之间的关联，并确定这种机制的调节是否可以成为新的治疗靶点。在2022年，使用内窥镜粘膜下层脱​​离的浅表ESCC组织检查了细胞衰老及其相关分泌因子（P21和IL-6）的蛋白质表达（P21和IL-6），并验证了与CDKN2A基因变体的关联。据揭示，在非癌性和非吸烟的女性中，p21蛋白表达特别高。接下来，将早期的ESCC组织准确地切入旁皮层区域，并在显微镜下将其上层从每个组织中提取RNA，然后进行RNA序列分析。通过比较背景风险因素（饮酒，吸烟，性别差异），并试图鉴定mRNA表达的特征变化，包括细胞衰老和非癌症和癌性区域的帕巴巴萨尔区域以及癌性区域的上层中的相关因素来比较这种全面的表达数据。